میکروسکوپ در منزل قوانین تهیه ریز اسلایدها نمونه های میکروسکوپ را خودتان انجام دهید

استانیسلاو یابلوکوف، دانشگاه دولتی یاروسلاول. P. G. Demidova

الان دو سال است که در خانه عالم صغیر را مشاهده می کنم و یک سال است که با دوربین از آن فیلم می گیرم. در این مدت با چشمان خودم دیدم که گلبول های خونی، فلس هایی که از بال پروانه ها می افتند و قلب حلزون چگونه می تپد. البته از کتاب‌های درسی، سخنرانی‌های ویدیویی و وب‌سایت‌های موضوعی چیزهای زیادی می‌توان آموخت. اما در عین حال هیچ احساس حضور، نزدیکی به چیزی که با چشم غیرمسلح قابل مشاهده نیست وجود نخواهد داشت. که اینها فقط کلماتی از یک کتاب نیستند، بلکه تجربه شخصی هستند. تجربه ای که امروزه در دسترس همه است.

پوست پیاز. بزرگنمایی 1000×. رنگ آمیزی ید. عکس هسته سلول را نشان می دهد.

پوست پیاز. بزرگنمایی 1000×. رنگ آمیزی آزور-ائوزین. در عکس، یک هسته در هسته قابل مشاهده است.

سیب زمینی. لکه های آبی دانه های نشاسته ای هستند. بزرگنمایی 100 برابر رنگ آمیزی ید.

فیلم پشت یک سوسک. بزرگنمایی 400×.

پوست آلو. بزرگنمایی 1000×.

بال یک سوسک بیبیونید. بزرگنمایی 400×.

بال پروانه زالزالک. بزرگنمایی 100 برابر

فلس از بال پروانه. بزرگنمایی 400×.

کلروپلاست ها در سلول های چمن. بزرگنمایی 1000×.

بچه حلزون. بزرگنمایی 40×.

برگ شبدر. بزرگنمایی 100 برابر برخی از سلول ها حاوی رنگدانه قرمز تیره هستند.

برگ توت فرنگی. بزرگنمایی 40×.

کلروپلاست ها در سلول های جلبک بزرگنمایی 1000×.

لکه خون. رنگ آمیزی با لاجورد ائوزین طبق رومانوفسکی. بزرگنمایی 1000×. در عکس: ائوزینوفیل در پس زمینه گلبول های قرمز.

لکه خون. رنگ آمیزی با لاجورد ائوزین طبق رومانوفسکی. بزرگنمایی 1000×. در عکس: در سمت چپ - یک مونوسیت، در سمت راست - یک لنفوسیت.

چه باید خرید

تئاتر با چوب لباسی شروع می شود و عکاسی میکرو با خرید تجهیزات و مهمتر از همه میکروسکوپ شروع می شود. یکی از مشخصه های اصلی آن مجموعه بزرگنمایی های موجود است که با حاصل ضرب بزرگنمایی چشمی و عدسی مشخص می شود.

هر نمونه بیولوژیکی برای مشاهده با بزرگنمایی بالا خوب نیست. این به این دلیل است که هر چه بزرگنمایی سیستم نوری بیشتر باشد، عمق میدان کمتر است. در نتیجه، تصویر سطوح ناهموار آماده سازی تا حدی تار خواهد شد. بنابراین، داشتن مجموعه ای از لنزها و چشمی ها که به شما امکان می دهد مشاهدات را با بزرگنمایی از 10-20 تا 900-1000× انجام دهید، مهم است. گاهی اوقات دستیابی به بزرگنمایی 1500 برابری (15 چشمی و 100 برابری شیئی) توجیه می شود. بزرگنمایی بیشتر بی معنی است، زیرا ماهیت موجی نور به ما اجازه نمی دهد جزئیات دقیق تری را ببینیم.

نکته مهم بعدی نوع چشمی است. می خواهید تصویر را با "چند چشم" مشاهده کنید؟ معمولا انواع تک چشمی، دو چشمی و سه چشمی وجود دارد. در مورد تک چشمی، شما مجبور خواهید بود که چشم را در حین مشاهده طولانی مدت خسته کنید. آنها با هر دو چشم به دوربین دوچشمی نگاه می کنند (نباید آن را با استریومیکروسکوپ که تصویری سه بعدی می دهد اشتباه گرفت). برای عکسبرداری و فیلمبرداری از اشیاء میکرو به یک "چشم سوم" نیاز دارید - یک پیوست برای نصب تجهیزات. بسیاری از تولیدکنندگان برای مدل های میکروسکوپ خود دوربین های خاصی تولید می کنند، اما شما می توانید با خرید یک آداپتور برای آن از یک دوربین معمولی نیز استفاده کنید.

مشاهده در بزرگنمایی بالا به دلیل دیافراگم کوچک لنزها نیاز به نور مناسب دارد. پرتو نور از روشن کننده، تبدیل به یک دستگاه نوری - یک کندانسور، آماده سازی را روشن می کند. بسته به ماهیت روشنایی، چندین روش مشاهده وجود دارد که رایج ترین آنها روش های میدان روشن و تاریک است. در اولین، ساده ترین، که برای بسیاری از مدرسه آشنا است، آماده سازی به طور مساوی از پایین روشن می شود. در این حالت از طریق قسمت‌های شفاف اپتیکال، نور به داخل عدسی منتشر می‌شود و در قسمت‌های مات جذب و پراکنده می‌شود. یک تصویر تیره در پس زمینه سفید به دست می آید، از این رو نام روش است. با یک کندانسور میدان تاریک، همه چیز متفاوت است. پرتو نوری که از آن بیرون می‌آید به شکل مخروط است؛ پرتوها وارد عدسی نمی‌شوند، اما روی یک نمونه مات، از جمله در جهت عدسی، پراکنده می‌شوند. در نتیجه، یک جسم روشن در پس زمینه تاریک قابل مشاهده است. این روش مشاهده برای مطالعه اجسام شفاف با کنتراست کم خوب است. بنابراین، اگر قصد دارید دامنه روش‌های مشاهده را گسترش دهید، باید مدل‌های میکروسکوپی را انتخاب کنید که تجهیزات اضافی را نصب می‌کنند: کندانسور میدان تاریک، دیافراگم میدان تاریک، دستگاه‌های کنتراست فاز، پلاریزرها و غیره.

سیستم های نوری ایده آل نیستند: عبور نور از آنها با اعوجاج تصویر همراه است - انحرافات. بنابراین سعی می کنند عدسی ها و چشمی ها را به گونه ای بسازند که این انحرافات تا حد امکان برطرف شود. همه اینها بر هزینه نهایی آنها تأثیر می گذارد. به دلایل قیمت و کیفیت، خرید لنزهای آکروماتیک پلان برای تحقیقات حرفه ای منطقی است. اهداف قوی (مثلاً بزرگنمایی 100×) هنگام استفاده از غوطه وری، روغن با ضریب شکست بالا، محلول گلیسرول (برای ناحیه UV) یا فقط آب، NA بیشتر از 1 دارند. بنابراین، اگر علاوه بر لنزهای "خشک" از لنزهای غوطه ور نیز استفاده می کنید، باید از قبل از مایع غوطه ور مراقبت کنید. ضریب شکست آن باید با یک عدسی خاص مطابقت داشته باشد.

گاهی باید به طراحی میز آبجکت و دستگیره های کنترل آن توجه کرد. همچنین ارزش انتخاب نوع روشنایی را دارد که می تواند یک لامپ رشته ای معمولی یا یک LED باشد که روشن تر است و کمتر گرم می شود. میکروسکوپ ها نیز ویژگی های فردی دارند. هر گزینه اضافی اضافه بر قیمت است، بنابراین انتخاب مدل و پیکربندی با مصرف کننده باقی می ماند.

امروزه اغلب میکروسکوپ های ارزان قیمت برای کودکان، تک چشمی با مجموعه کوچکی از لنزها و پارامترهای متوسط ​​خریداری می کنند. آنها می توانند به عنوان نقطه شروع خوبی نه تنها برای کاوش در ریزجهان، بلکه برای آشنایی با اصول اولیه میکروسکوپ باشند. پس از این، کودک باید دستگاه جدی تری بخرد.

نحوه تماشا

شما می توانید کیت های داروهای آماده را خریداری کنید که به مراتب ارزان نیستند، اما در این صورت احساس مشارکت شخصی در مطالعه چندان واضح نخواهد بود و دیر یا زود خسته می شوند. بنابراین، هم در مورد اشیاء برای مشاهده و هم در مورد وسایل موجود برای تهیه آماده سازی باید دقت شود.

مشاهده در نور عبوری فرض می کند که جسم مورد بررسی کاملاً نازک است. حتی پوست توت یا میوه خیلی ضخیم است، بنابراین بخش ها زیر میکروسکوپ بررسی می شوند. در خانه، آنها با تیغ های معمولی ساخته می شوند. برای جلوگیری از خرد شدن پوست، آن را بین قطعات چوب پنبه قرار می دهند یا با پارافین پر می کنند. با کمی مهارت، می توانید به ضخامت برش چند لایه سلولی دست پیدا کنید، اما در حالت ایده آل باید با یک لایه تک سلولی از بافت کار کنید - چندین لایه سلول تصویری مبهم و آشفته ایجاد می کنند.

آماده سازی آزمایش بر روی یک لام شیشه ای قرار می گیرد و در صورت لزوم با یک ورقه پوششی پوشانده می شود. می توانید عینک را از فروشگاه تجهیزات پزشکی خریداری کنید. اگر این آماده سازی به خوبی به لیوان نمی چسبد، با خیس کردن کمی آن با آب، روغن غوطه وری یا گلیسیرین ثابت می شود. هر دارویی بلافاصله ساختار خود را آشکار نمی کند؛ گاهی اوقات باید با رنگ کردن عناصر تشکیل شده خود "کمک" کرد: هسته ها، سیتوپلاسم، اندامک ها. ید و سبز درخشان رنگ های خوبی هستند. ید یک رنگ نسبتا جهانی است، می توان از آن برای رنگ آمیزی طیف گسترده ای از آماده سازی های بیولوژیکی استفاده کرد.

هنگام بیرون رفتن از طبیعت، باید کوزه هایی را برای جمع آوری آب از نزدیکترین آب و کیسه های کوچک برای برگ ها، بقایای خشک شده حشرات و غیره ذخیره کنید.

چه چیزی را تماشا کنیم

میکروسکوپ خریداری شده است، ابزار خریداری شده است - زمان شروع است. و شما باید با در دسترس ترین شروع کنید - به عنوان مثال، پوست پیاز. به خودی خود نازک، رنگ آمیزی شده با ید، هسته های سلولی را به وضوح قابل تشخیص در ساختار خود نشان می دهد. این آزمایش که از مدرسه به خوبی شناخته شده است، ارزش انجام آن را دارد. پوست پیاز را باید با ید به مدت 10-15 دقیقه آغشته کنید، سپس زیر آب جاری بشویید.

علاوه بر این، می توان از ید برای رنگ آمیزی سیب زمینی استفاده کرد. برش باید تا حد امکان نازک باشد. به معنای واقعی کلمه 5-10 دقیقه از حضور آن در ید لایه هایی از نشاسته را آشکار می کند که به رنگ آبی در می آید.

تعداد زیادی از اجساد حشرات در حال پرواز اغلب در بالکن ها جمع می شوند. برای خلاص شدن از شر آنها عجله نکنید: آنها می توانند به عنوان مواد ارزشمندی برای تحقیق استفاده شوند. همانطور که از عکس ها می بینید، متوجه خواهید شد که حشرات موهایی روی بال های خود دارند که از خیس شدن آنها محافظت می کند. کشش سطحی بالای آب اجازه نمی دهد قطره از طریق موها "ریزش" کند و بال را لمس کند.

اگر تا به حال بال پروانه یا پروانه را لمس کرده باشید، احتمالاً متوجه شده اید که نوعی "گرد و غبار" از روی آن پرواز می کند. عکس ها به وضوح نشان می دهند که این گرد و غبار نیست، بلکه فلس هایی از بال ها است. آنها اشکال مختلفی دارند و به راحتی جدا می شوند.

علاوه بر این، با استفاده از میکروسکوپ، می توانید ساختار اندام حشرات و عنکبوت ها را مطالعه کنید و به عنوان مثال، لایه های کیتینی پشت یک سوسک را بررسی کنید. و با بزرگنمایی مناسب، مطمئن شوید که چنین فیلم هایی از مقیاس های کاملاً مجاور (احتمالاً ذوب شده) تشکیل شده اند.

یک شیء به همان اندازه جالب توجه، پوست توت ها و میوه ها است. با این حال، یا ساختار سلولی آن ممکن است غیر قابل تشخیص باشد، یا ضخامت آن اجازه تصویر واضح را نمی دهد. به هر طریقی، قبل از تهیه یک آماده سازی خوب، باید تلاش های زیادی انجام دهید: انواع مختلف انگور را مرتب کنید تا رنگی را پیدا کنید که در آن مواد رنگی پوست شکل جالبی داشته باشد، یا چندین بخش از پوست را بسازید. یک آلو، به یک لایه تک سلولی می رسد. در هر صورت، پاداش کار انجام شده شایسته خواهد بود.

علف‌ها، جلبک‌ها و برگ‌ها حتی برای تحقیق در دسترس‌تر هستند. اما، با وجود شیوع گسترده آنها، انتخاب و تهیه یک داروی خوب از آنها می تواند دشوار باشد. جالب ترین چیز در مورد سبزی ها شاید کلروپلاست ها باشد. بنابراین، برش باید بسیار نازک باشد.

جلبک های سبز که در هر آب آزاد یافت می شوند، اغلب ضخامت قابل قبولی دارند. در آنجا می توانید جلبک های شناور و ساکنان آبزی میکروسکوپی - حلزون های جوان، دافنیا، آمیب ها، سیکلوپ ها و دمپایی ها را نیز پیدا کنید. یک بچه حلزون کوچک که از نظر نوری شفاف است به شما امکان می دهد ضربان قلبش را ببینید.

محقق خودت

پس از مطالعه داروهای ساده و در دسترس، می خواهید تکنیک مشاهده را پیچیده کنید و کلاس اشیاء مورد مطالعه را گسترش دهید. برای انجام این کار، به ادبیات خاص و ابزارهای تخصصی، خاص برای هر نوع شی نیاز دارید، اما هنوز هم جهانی بودن. به عنوان مثال، روش رنگ آمیزی گرم، که در آن انواع مختلف باکتری ها شروع به تغییر رنگ می کنند، می تواند روی سلول های غیر باکتریایی دیگر اعمال شود. روش رنگ آمیزی اسمیر خون طبق رومانوفسکی نیز به آن نزدیک است. هم رنگ مایع آماده و هم پودر متشکل از اجزای آن - لاجورد و ائوزین - برای فروش موجود است. آنها را می توان در فروشگاه های تخصصی خریداری کرد یا به صورت آنلاین سفارش داد. اگر نمی توانید رنگ را دریافت کنید، می توانید از دستیار آزمایشگاهی که آزمایش خون شما را در کلینیک انجام می دهد، یک تکه شیشه با یک اسمیر لکه دار بخواهید.

در ادامه مبحث خون پژوهی باید به اتاق گوریایف - دستگاهی برای شمارش تعداد گلبول های خون و تخمین اندازه آنها اشاره کرد. روش های مطالعه خون و سایر مایعات با استفاده از دوربین Goryaev در ادبیات تخصصی شرح داده شده است.

در دنیای مدرن که ابزارها و وسایل فنی مختلف در فاصله چند قدمی قرار دارند، هرکسی خودش تصمیم می گیرد که پول خود را برای چه چیزی خرج کند. این می تواند یک لپ تاپ گران قیمت یا یک تلویزیون با اندازه مورب گزاف باشد. کسانی هم هستند که با خرید تلسکوپ نگاه خود را از صفحه نمایش دور می کنند و آن را به فضا می برند. میکروسکوپی می تواند به یک سرگرمی جالب و برای برخی حتی یک هنر تبدیل به وسیله ای برای بیان خود شود. با نگاه کردن از طریق چشمی میکروسکوپ، به اعماق طبیعتی که خود ما نیز بخشی از آن هستیم نفوذ می کنیم.

"علم و زندگی" در مورد عکاسی میکرو:

میکروسکوپ "آنالیت" - 1987، شماره 1.

Oshanin S.L. با میکروسکوپ کنار برکه. - 1988، شماره 8.

اوشانین اس. ال. زندگی نامرئی برای جهان. - 1989، شماره 6.

Miloslavsky V. Yu. - 1998، شماره 1.

مولوژینا ن. - 2007، شماره 4.

واژه نامه برای مقاله

دیافراگم- باز شدن واقعی سیستم نوری که بر اساس ابعاد آینه ها، لنزها، دیافراگم ها و سایر قطعات تعیین می شود. زاویه α بین پرتوهای بیرونی یک پرتو نور مخروطی شکل، دیافراگم زاویه ای نامیده می شود. دیافراگم عددی A = n sin(α/2)، که در آن n ضریب شکست محیطی است که شی مورد مشاهده در آن قرار دارد. وضوح دستگاه متناسب با A است، روشنایی تصویر A 2 است. برای افزایش دیافراگم از غوطه وری استفاده می شود.

غوطه وری- مایع شفاف با ضریب شکست n> 1. نمونه و عدسی میکروسکوپ در آن غوطه ور می شوند و دیافراگم آن افزایش می یابد و در نتیجه وضوح آن افزایش می یابد.

لنز پلاناکروماتیک- عدسی با انحراف رنگی تصحیح شده، که تصویری صاف در کل میدان ایجاد می کند. آکرومات ها و آپوکرومات های معمولی (به ترتیب انحرافات اصلاح شده برای دو و سه رنگ) یک میدان منحنی ایجاد می کنند که قابل اصلاح نیست.

کنتراست فاز- یک روش تحقیق میکروسکوپی مبتنی بر تغییر فاز موج نوری که از یک آماده سازی شفاف عبور می کند. فاز نوسان با چشم غیرمسلح قابل مشاهده نیست، بنابراین اپتیک های ویژه - یک کندانسور و یک عدسی - تفاوت فاز را به یک تصویر منفی یا مثبت تبدیل می کنند.

مونوسیت ها- یکی از اشکال گلبول های سفید.

کلروپلاست ها- اندامک های سبز سلول های گیاهی که مسئول فتوسنتز هستند.

ائوزینوفیل ها- سلول های خونی که نقش محافظتی در واکنش های آلرژیک دارند.

هنگام ساخت میکرو اسلایدهای موقت، دنباله عملیات زیر باید رعایت شود:

• 1. اسلاید و روکش را بشویید و کاملا خشک کنید. برای جلوگیری از شکستن لغزش پوشش بسیار شکننده، آن را در چین یک دستمال بین انگشت شست و سبابه دست راست خود قرار دهید و به آرامی با حرکت دایره ای انگشتان خود آن را پاک کنید.
• 2. یک قطره مایع (آب، گلیسیرین، محلول، معرف یا رنگ) را با پیپت روی لام بمالید.
• 3. بخشی از اندام مورد مطالعه را با استفاده از تیغه ایجاد کنید. تیغه باید خیلی تیز باشد.
• 4. نازک ترین بخش را انتخاب کنید و با استفاده از یک سوزن تشریح یا برس نازک آن را به مرکز لام در یک قطره مایع انتقال دهید.
• 5. قسمت را با یک شیشه درپوش بپوشانید تا هوا به زیر آن نرود. برای این کار شیشه روکش را با دو انگشت از لبه ها گرفته و لبه پایینی را با زاویه به لبه قطره مایع بیاورید و به آرامی پایین بیاورید.
• 6. اگر مایع زیادی وجود دارد و از زیر شیشه کاور بیرون می ریزد، با استفاده از کاغذ صافی آن را بردارید. اگر فضاهای پر از هوا در زیر شیشه وجود دارد، مایع را با قرار دادن یک قطره از آن در نزدیکی لبه شیشه پوشش، و کاغذ صافی را در طرف مقابل اضافه کنید.

دیر یا زود، معلمان زیست شناسی و رهبران حلقه با وظیفه ساختن یک میکرواسلاید آموزشی مواجه می شوند. چه نوع ماده ای قادر است یک جسم بیولوژیکی را برای مدت طولانی ثابت کند و چگونه می توان این روش را ساده و در دسترس کرد. مومیایی‌های معروف (رزین‌های تثبیت‌کننده) هرگز به عنوان موادی که به راحتی در دسترس هستند، به‌ویژه دور از شهرهای بزرگ در نظر گرفته نشده‌اند. علاوه بر این، آنها می گویند که این مواد بی ضرر نیستند. و در نهایت، روند استفاده از آنها بسیار دشوار است.

برای تهیه دارو می توانید از چسب PVA استفاده کنید. مهم است که آماده سازی مرطوب، خوب مرطوب شده باشد و چسب تازه و کمی با آب جوشیده سرد تمیز به غلظت لازم رقیق شده باشد (چسب امولسیون است و به راحتی رقیق می شود). پس از چندین آزمون و خطا، می توان غلظت مورد نظر را بدون مشکل جمع آوری و تعیین کرد.

سپس، یک قطره آب - جوشانده یا مقطر - روی یک اسلاید شیشه ای تمیز ریخته می شود. آب باید با احتیاط با یک پارچه تمیز و بدون مو یا کاغذ صافی پاک شود تا شیشه کمی مرطوب شود. این، و همچنین رطوبت نمونه، باعث خیس شدن یکنواخت (بدون حباب) می شود. یک قطره کوچک از چسب PVA از قبل آماده شده را روی سطح آماده شده بمالید تا هیچ حباب هوا ظاهر نشود. گاهی اوقات آنها تداخلی ندارند، اما ظاهر دارو را خراب می کنند. یک بخش یا نمونه از پیش آماده شده، به عنوان مثال، دافنی که قبلاً با آب داغ کشته شده است، با دقت به این قطره منتقل می شود. سپس با یک حرکت شیبدار صاف، یک لیوان پوششی را روی آن قرار دهید، همچنین تمیز و کمی مرطوب باشد. لایه چسب بین لیوان ها باید تا حد امکان نازک باشد.

اگر چیزی از کار بیفتد و نمونه با ارزش و به اندازه کافی بزرگ باشد، تقریباً همیشه برخلاف رزین ها، می توان آن را با آب معمولی شست و این روش را تکرار کرد. چسب اضافی به دقت با یک جریان نازک آب شسته می شود. شما باید مطمئن شوید که بین شیشه ها جریان ندارد. شیشه پوشش باید نگه داشته شود. بقایای آب کمی کدر را می توان با کاغذ صافی یا یک نوار پارچه نازک و بدون پرز به دقت پاک کرد. روش تهیه میکرو اسلاید زیستی

آماده سازی آماده شده باید در یک مکان گرم و خشک گذاشته شود. شاخص آمادگی دارو شفافیت آن است. بسته به عوامل بسیاری، خشک شدن تا حالت شفاف از یک تا چهار هفته طول می کشد. این اتفاق می افتد که یک لایه چسب که خیلی ضخیم است یا چسب آلوده به ناخالصی ها کاملاً شفاف نمی شود - این تا حدودی تصویر را تخریب می کند ، اما به لطف عمق میدان کم میکروسکوپ ، حتی چنین آماده سازی هایی برای مطالعه در دسترس است.

هیچ تضمینی وجود ندارد که بتوان از این روش برای تهیه هر گونه آماده سازی استفاده کرد، زیرا برخی نیاز به رنگرزی دارند و رنگ ها ممکن است با چسب واکنش نشان دهند.

T.N. لاشکینا معلم زیست شناسی و بوم شناسی دبیرستان شماره 23 از شهر سیزران روش زیر را برای تهیه میکرو اسلاید ارائه می دهد. می توانید ژلاتین معمولی را بردارید و آن را با آب پر کنید تا پف کند. سپس کمی ژلاتین پف کرده (بدون آب) را در یک قاشق غذاخوری بریزید و روی آتش بگذارید. وقتی ژلاتین حل شد (نمی خواهید بجوشد)، آن را روی یک اسلاید شیشه ای بیندازید. نمونه را در این قطره قرار دهید و روی آن را با یک نوار کاور بپوشانید، آن را با انگشت خوب فشار دهید تا ژلاتین به طور یکنواخت پخش شود. میکروپرپریشن آماده است.

در صورت در دسترس نبودن روکش می توان از سلفون به جای روکش استفاده کرد. علاوه بر این، سلفون یک مزیت دارد: ریز آماده سازی نمی تواند خرد شود، زیرا سلفون کشسان است و مانند شیشه های روکش ترک نمی خورد.

باید سریع با ژلاتین کار کنید وگرنه سفت میشه. اما اگر این اتفاق افتاد، لیوان را روی آتش نگه دارید تا ژلاتین دوباره مایع شود. ژلاتین بی ضرر، در دسترس و بسیار مقرون به صرفه است.

موسسه آموزشی بودجه دولتی

آموزش عالی حرفه ای

"دانشگاه پزشکی دولتی باشکر"

وزارت بهداشت، درمان و توسعه اجتماعی

فدراسیون روسیه

گروه فارماکوگنوزی با دوره گیاه شناسی و مبانی طب گیاهی

"9" _ سپتامبر _____2012

انضباط گیاه شناسیتخصص 060301 داروخانه

خوب 1 (بخش تمام وقت)نیمسال 1

بخش: «آموزه سلول. مواد ارگاستیک و ترشحی در سلول گیاهی

کار آزمایشگاهی شماره 1

با موضوع: میکروسکوپ های نوری. ویژگی های میکروتکنولوژی گیاه شناسی خواص اسمزی یک سلول گیاهی

کار آزمایشگاهی شماره 2

با موضوع: "ساختار دیواره سلولی. پلاستیدها، ذخایر و مواد معدنی"

دانش آموزان

یوفا 2012
کار آزمایشگاهی شماره 1

موضوع درس: میکروسکوپ های نوری. ویژگی های میکروتکنولوژی گیاه شناسی خواص اسمزی یک سلول گیاهی

1. ارتباط.مطالعه تکنیک های میکروتکنولوژی گیاه شناسی شرط لازم برای تسلط بر مهارت های عملی در بخش سیتولوژی، بافت شناسی و آناتومی گیاهی است. مطالعه ساختار یک سلول گیاهی و ویژگی‌های اسمزی آن ایده‌ای از سازمان سلولی موجودات گیاهی، ویژگی‌های ساختاری و تفاوت‌های موجود با حیوانات می‌دهد.

2. اهداف درس:

1. کسب مهارت در کار با میکروسکوپ.

2. در تهیه میکرو اسلایدهای موقت مهارت کسب کنید

3. کسب مهارت در میکروتکنولوژی گیاه شناسی برای تجزیه و تحلیل میکروسکوپی مواد گیاهی دارویی کامل، بریده شده و پودر شده.

4. بررسی ویژگی های ساختاری یک سلول گیاهی

5. بررسی خواص یک سلول گیاهی

دانستن :

· دستگاه میکروسکوپ و قوانین کار با آن.

· تاریخچه مطالعه سلول ها، فرضیه های نظریه سلولی.

· ساختار یک سلول پروکاریوتی.

· ساختار یک سلول یوکاریوتی، اندامک های اصلی آن.

· ویژگی های ساختاری یک سلول گیاهی.

برای توسعه شایستگی های حرفه ای، دانش آموز باید قادر بودن به :

· یک میکرو اسلاید تهیه کنید.

یک نمونه میکروسکوپی را در میکروسکوپ با بزرگنمایی کم و زیاد بررسی کنید.

· یافتن اندام های سلولی.

· انجام واکنش های پلاسمولیز و دپلاسمولیز، ارائه یک توجیه نظری.

برای توسعه شایستگی حرفه ای، دانش آموز باید خود :

· دستگاه مفهومی گیاه شناسی.

· تکنیک میکروسکوپ و آنالیز هیستوشیمیایی ریزآماده سازی اجسام گیاهی.

3. دانش و مهارت های اولیه مورد نیاز:

· ایده های مدرن در مورد ساختار سلول های پروکاریوتی و یوکاریوتی، تفاوت های آنها.

دستگاه میکروسکوپ

4. مدت کار فوق برنامه– 2 ساعت تحصیلی (90 دقیقه).

سوالات برای خودآموزی:

1. میکروسکوپ. سیستم های مکانیکی و نوری

2. قوانین کار با میکروسکوپ

3. فاصله کاری. وضوح. افزایش عمومی

4. قفس. تاریخچه مطالعه. نظریه سلولی

5. تفاوت سلول گیاهی با سلول قارچی و حیوانی

6. ساختار سلولی. هسته، ساختار، توابع.

7. اندامک های سلولی گیاهی. ساختار، توابع

8. سیتوپلاسم. ساختار، توابع

9. واکوئل، ساختار، توابع

توضیح وظایف

میکروسکوپ.

میکروسکوپ یک سیستم نوری-مکانیکی است که به فرد امکان می دهد تصاویری با بزرگنمایی بسیار بالا از اجسامی که ابعاد آنها بسیار فراتر از وضوح چشم غیر مسلح است به دست آورد. وضوح چشم 0.15 میلی متر است. قدرت تفکیک میکروسکوپ های نوری 300-400 برابر بیشتر از وضوح چشم غیر مسلح و برابر با 0.1-0.3 میکرون است.

میکروسکوپ بین سیستم های نوری و مکانیکی تمایز قائل می شود. سیستم نوری از یک دستگاه روشنایی، یک لنز و یک چشمی تشکیل شده است. سیستم مکانیکی شامل یک هفت تیر، لوله، سه پایه، استیج، ماکرو و میکروپیچ می باشد.

دستگاه روشنایی شامل:

کندانسور (طراحی شده برای بهترین نور، تنظیم وضوح تصویر)؛

دیافراگم عنبیه (طراحی شده برای تنظیم قطر پرتو نور و عمق میدان دید)؛

آینه (طراحی شده برای هدایت پرتوها از منبع نور به کندانسور).

لنز مهمترین بخش سیستم نوری است. عدسی تصویری از یک شی را با آرایش معکوس قطعات تولید می کند. در عین حال، ساختارهایی را آشکار می کند («حل می کند») که برای چشم غیر مسلح غیرقابل دسترس هستند.

چشمی برای مشاهده تصویر ایجاد شده توسط عدسی استفاده می شود. دیافراگم چشمی مرزهای میدان دید را تعیین می کند. به طور کلی، عدسی و چشمی هم وضوح میکروسکوپ را ارائه می دهند و هم بزرگنمایی کلی میکروسکوپ را تعیین می کنند (بزرگنمایی کلی میکروسکوپ به عنوان حاصلضرب بزرگنمایی چشمی شیئی تعریف می شود).

سیستم مکانیکی میکروسکوپ برای نصب قطعات سیستم نوری طراحی شده است.

کار با میکروسکوپ

1. میکروسکوپ را در مقابل شانه چپ خود قرار دهید و فضایی را برای آلبوم در مقابل خود باز کنید. لنز را در موقعیت کاری قرار دهید. نصب صحیح لنز باید با کلیکی که هنگام چرخاندن هفت تیر احساس می شود قضاوت شود. فاصله بین لنز و اسلاید باید حدود 1 سانتی متر باشد.کار با میکروسکوپ همیشه با بزرگنمایی کم شروع می شود.

2. دیافراگم را کاملا باز کنید. کندانسور را تا سطح استیج بالا ببرید. نور را با استفاده از یک آینه مقعر هدایت کنید تا کل میدان به طور روشن و یکنواخت روشن شود.

3. میکرواسلاید آماده شده را طوری روی استیج قرار دهید که یکی از قسمت ها دقیقا زیر لنز قرار گیرد. برای رفع میکرو اسلاید، لام را با گیره فشار دهید.

4. با استفاده از ماکرو اسکرو، فاصله کانونی مورد نیاز را برای به دست آوردن تصویر واضح در میکروسکوپ تنظیم کنید. فاصله را با استفاده از میکرو اسکرو تنظیم کنید.

5. قبل از اینکه میکروسکوپ را به بزرگنمایی بالاتر بچرخانید، محل بخش مورد نظر را انتخاب کنید، آن را در مرکز میدان دید قرار دهید و تنها پس از آن با چرخاندن دقیق هفت تیر، لنزها را عوض کنید.

6. پس از اتمام کار، باید میکروسکوپ را روی بزرگنمایی کم تغییر دهید و میکرونمونه را بردارید.

7. پس از استفاده، میکروسکوپ باید با درپوشی پوشانده شود تا از گرد و غبار محافظت شود.

روش تهیه میکرواسلایدهای موقت

1. شیء را باید در دست چپ گرفت و با سه انگشت نگه داشت؛ یک تیغ یا تیغ ایمنی باید در دست راست نگه داشت.

2. سطح جسم را طوری تراز کنید که صفحه برش عمود بر محور اندام باشد. برش ها با حرکت تیغ به سمت شما ایجاد می شوند.

3. 2-3 قطره آب را با پیپت به وسط لام بریزید و نازک ترین قسمت ها را به نوک سوزن کالبد شکاف منتقل کنید، جسم را با یک لاستیک بپوشانید. مایع نباید از زیر پوشش نشت کند.

4. آماده شده را روی صحنه قرار دهید و با بزرگنمایی کم و زیاد بررسی کنید.

5. برای مطالعه اشیا علاوه بر آماده سازی موقت، از آماده سازی دائمی استفاده می شود. مایع موجود در آنها گلیسیرین با ژلاتین یا بلسان کانادایی است.

6. هنگام رنگ آمیزی آماده سازی باید در نظر داشت که تحت تأثیر اسیدهای غلیظ، ادخال های آلی در سلول ممکن است ذغالی شوند و ادخال های معدنی (کریستال ها، دروزن، سیستولیت ها) به طور کامل ناپدید شوند یا شکل خود را تغییر دهند.

7. نمی توانید دارو را از زیر لنز x40 خارج کنید، زیرا ... فاصله کاری آن 0.6 میلی متر است و لنز جلو به راحتی آسیب می بیند.

سلول

سلول واحد اصلی ساختاری و عملکردی همه موجودات زنده است. سلول ها برای اولین بار توسط رابرت هوک در اواسط قرن هفدهم (1665) در حین بررسی یک قطعه چوب پنبه توصیف شد. دانش در مورد سلول با بهبود میکروسکوپ گسترش یافت. در اواسط قرن نوزدهم، دانش کافی در مورد سلول انباشته شده بود - کشف هسته، پلاستیدها، تقسیم سلولی، و غیره. تمام دانش در مورد سلول در اواخر دهه 30-40 قرن نوزدهم تعمیم یافت. M. Schleiden گیاه شناس و T. Schwann جانورشناس در قالب نظریه سلولی.

تزهای اصلی نظریه سلولی:

1. سلول - واحد ساختاری و عملکردی همه موجودات زنده.

2. ارگانیسم چند سلولی یک سیستم پیچیده سازمان یافته و یکپارچه متشکل از سلول های فعال و متقابل است.

3. تمام سلول ها از نظر ساختار همولوگ هستند.

4. «سلول از سلول». اصل تداوم سلول از طریق تقسیم در سال 1958 توسط دانشمند آلمانی R. Virchow پایه گذاری شد.

شکل، ساختار و اندازه سلول ها بسیار متنوع است. یک سلول گیاهی از پروتوپلاست، غشاء یا دیواره سلولی و واکوئل.

پروتوپلاستشامل می شود: سیتوپلاسم، هسته، پلاستیدها، میتوکندری.

سیتوپلاسم- بخشی از پروتوپلاست که بین پلاسمالما و هسته محصور شده است. اساس سیتوپلاسم ماتریکس آن است یا هیالوپلاسم- یک سیستم کلوئیدی پیچیده و بی رنگ. مهمترین نقش هیالوپلاسم این است که تمام ساختارهای سلولی را در یک سیستم واحد متحد کند و از تعامل بین آنها در فرآیندهای متابولیسم سلولی اطمینان حاصل کند. سیتوپلاسم بیشتر فرآیندهای متابولیسم سلولی را انجام می دهد، به جز سنتز اسیدهای نوکلئیک.

هسته- بخش اجباری و اصلی سلول زنده همه یوکاریوت ها. وظایف هسته: ذخیره و تولید مثل اطلاعات ارثی، کنترل متابولیسم و ​​تقریباً تمام فرآیندهای رخ داده در سلول، سنتز اسیدهای نوکلئیک، سنتز پروتئین. هسته توسط پوسته ای متشکل از دو غشاء با منافذ بسیار بزرگ احاطه شده است. محتویات داخلی هسته را شیره هسته یا نوکلئوپلاسم می نامند. یک یا چند هسته در شیره هسته غوطه ور می شوند.

میتوکندریاندامک های سلولی که شکل، اندازه و تعداد آنها دائماً در حال تغییر است. عملکرد اصلی تامین انرژی مورد نیاز سلول از طریق اکسیداسیون مواد غنی از انرژی (قندها) و سنتز ATP و ADP است. میتوکندری ها توسط دو غشاء احاطه شده اند، غشای داخلی به شکل برآمدگی ها - cristae. میتوکندری ها مانند پلاستیدها اندامک های نیمه مستقل هستند، زیرا حاوی DNA و ریبوزوم در ماتریکس است.

پلاستیدهامشخصه فقط گیاهان سه نوع پلاستید وجود دارد: کلروپلاست، کروموپلاست و لوکوپلاست. عملکرد اصلی کلروپلاست ها فتوسنتز است، لوکوپلست ها ذخیره مواد مغذی و کروموپلاست ها رنگ گل ها و میوه ها هستند. کلروپلاست ها از یک غشای دوگانه، یک ماتریکس، تیلاکوئیدهای متحد شده در گرانا، DNA، ریبوزوم ها و دانه های نشاسته اولیه تشکیل شده اند.

مجموعه گلژی- سیستمی از کیسه ها و وزیکول های دیسکی شکل که توسط غشاء احاطه شده اند. عملکردهای سنتز، تجمع و آزادسازی پلی ساکاریدهای خاص (پکتین، مخاط و غیره)، متابولیت های ثانویه را انجام می دهد. تشکیل واکوئل ها و لیزوزوم ها؛ توزیع و انتقال درون سلولی پروتئین های خاص؛ در ساخت غشای سیتوپلاسمی شرکت می کند.

ER (شبکه آندوپلاسمی) –سیستمی از کانال های زیر میکروسکوپی محدود شده توسط غشاء. EPS به دو دسته صاف و خشن تقسیم می شود. توابع ER خشن: سنتز پروتئین. انتقال مستقیم ماکرومولکول ها و یون ها؛ تشکیل غشاء؛ برهمکنش اندامک ها عملکرد ER صاف سنتز ترکیبات چربی دوست است.

واکوئل- حفره ای در یک سلول که توسط یک غشاء (تونوپلاست) احاطه شده و با شیره سلولی پر شده است. شیره سلولی محلول آبی از مواد مختلف - محصولات زائد پروتوپلاست است. توابع واکوئل ها: انباشته شدن مواد ذخیره و ضایعات. حفظ تورگ سلولی؛ تنظیم تعادل آب و نمک سلول

دیواره سلولیسلول را از محیط خود جدا می کند. این بر اساس مولکول های سلولز است که به میکروفیبریل ها و فیبریل ها تقسیم می شوند. مولکول های سلولز در ماتریکسی غوطه ور می شوند که از پلی ساکاریدهایی با ساختار منشعب تر - همی سلولزها و پکتین ها و همچنین آب تشکیل شده است. دیواره سلولی بسیار قوی و در عین حال الاستیک است. مولکول های سلولز به آن قدرت و کشش - ماتریکس می دهند. دیواره سلولی عملکردهای شکل دهی و مکانیکی را انجام می دهد، از پروتوپلاست محافظت می کند، در برابر فشار اسمزی بالای واکوئل مقاومت می کند و حمل و نقل مواد از طریق دیواره سلولی انجام می شود.

میکروسکوپ.

در این مقاله به شما 3 روش آماده سازی میکروسکوپ را می گویم. این روش ها ساده ترین هستند.

در ابتدای مقاله به اصطلاح فرهنگ لغت یا بهتر بگوییم توضیحی درباره چیستی این یا آن موضوع وجود دارد.

ساخت میکرو اسلاید به ابزار، رنگ های خاص و همچنین دقت و مهارت خاصی نیاز دارد. رعایت دقیق تمام شرایط لازم بسیار مهم است - در غیر این صورت میکرو اسلاید ممکن است برای تحقیق نامناسب باشد.

مجموعه های آماده ای از داروها برای تحقیق در فروش وجود دارد (که برای خانه و مدرسه مناسب است) - به عنوان مثال، 25 دارو، یا 38 اسلاید از Leeuwenhoek. و همچنین مواد معدنی و مجموعه های دیگر.

توضیحات

داروی ثابت- در میکروبیولوژی، اغلب آماده سازی های ثابت تهیه می شود، بنابراین باید بدانید که چه هستند. این آماده سازی ها به صورت رنگی زیر میکروسکوپ بررسی می شوند. کلمه "تثبیت" به معنای چنین پردازش یک جسم زنده است (که می خواهید در نظر بگیرید) که باعث می شود به سرعت فرآیندهای زندگی را در یک شی خاص قطع کنید (اجازه دهید ساده تر توضیح دهم - بکشید) و در عین حال ساختار خوب را حفظ کنید. . در نتیجه تثبیت، سلول ها محکم به شیشه چسبیده و بهتر رنگ آمیزی می شوند. تثبیت در هنگام کار با میکروارگانیسم های بیماری زا (برای اهداف ایمنی شخصی) ضروری است.

تعلیق- مخلوطی از هر ماده ای که در آن ماده جامد به شکل ذرات کوچک در یک ماده مایع در حالت ته نشین نشده توزیع می شود.

حلقه بیولوژیکی- یک چوب فلزی نازک با یک حلقه فلزی نازک در انتهای آن. برای گرفتن مقدار کمی از یک سوسپانسیون خاص از میکروارگانیسم ها استفاده می شود.

نفت خام- مایع پماد مانند، بی بو و بی مزه. این مخلوط از روغن معدنی و موم پارافین (مخلوط موم مانند) تشکیل شده است.

آب بندی- اطمینان از نفوذ ناپذیری کامل سطوح و اتصالات قطعات به گازها و مایعات مختلف.

آگار آگار- در میکروبیولوژی برای تولید محیط های غذایی جامد و نیمه مایع، یعنی محیط های آگار استفاده می شود.

مایع کارنوی- مایع برای تثبیت

مشعل- دستگاهی دارای انژکتوری که در یک لوله فلزی با سوراخ هایی برای ورود هوای اتمسفر به این لوله تعبیه شده است که روی پایه ای با ورودی جانبی برای گازرسانی به لوله نصب می شود، در حالی که سوراخ ها در سطح جانبی لوله ایجاد می شود. روی لوله ای که برای تغییر منبع هوا به مشعل می توان یک دمپر متحرک نصب کرد که ناحیه جریان این سوراخ ها را تغییر می دهد.

مخلوط نیکیفوروف- مخلوطی از حجم مساوی از الکل اتیلیک و اتر سولفوریک بی آب که برای تثبیت لکه های خونی، لکه های اندام ها و هر بافتی استفاده می شود.

آماده سازی آماده سازی "قطره خرد شده".

آماده سازی آماده سازی قطره آویزان

قطره آویزان.

1. با استفاده از یک حلقه بیولوژیکی، یک قطره از سوسپانسیون میکروارگانیسم را (از قبل آماده شده) به دقت روی یک پوشش تمیز بمالید.
2. لغزش پوشش حاوی یک قطره تعلیق را برعکس کنید تا قطره آزادانه آویزان شود.
3. ورقه پوشش معکوس حاوی قطره را روی چاه یک ورقه پوششی مخصوص با فرورفتگی در مرکز قرار دهید.
4. قطره نباید لبه های لیوان و فرورفتگی (خوب) را لمس کند، باید آزادانه روی شیشه روکش آویزان شود.
5. لبه های فرورفتگی یک شیشه روکش مخصوص از قبل با وازلین روغن کاری می شود تا محفظه آب بندی شود.
6. از مشاهده باکتری ها در میکرواسلایدها لذت ببرید!

آماده سازی آماده سازی "حصر".

از محیط آگار، که روی آن هر میکروارگانیسمی در یک چمن پیوسته مطلق یا به شکل مستعمرات منفرد رشد می کند، یک مکعب نه چندان بزرگ را با اسکالپل با دقت برش دهید.

آن را به یک اسلاید شیشه ای منتقل کنید تا سطح مکعب دارای میکروارگانیسم ها به سمت بالا باشد.

سپس یک لیوان روکش معمولی (کاملاً تمیز) را روی چمن میکروارگانیسم ها یا مستعمره، با احتیاط و نه با فشار، بلکه به آرامی بمالید، آن را با یک حلقه بیولوژیکی یا موچین فشار دهید و بلافاصله آن را بردارید و مراقب باشید که آن را به کناری منتقل نکنید. .

آماده سازی به دست آمده (روکش شیشه با اثر) با اثر پایین در یک قطره آب معمولی بر روی یک اسلاید شیشه ای تمیز قرار می گیرد. همچنین می توان با لمس سطح کلنی با لام روی یک اسلاید شیشه ای اثری به دست آورد.

1. دارو آماده است!
2. توجه!آماده سازی سلول های زنده با استفاده از "سیستم های خشک" میکروسکوپ بررسی می شود. پس از میکروسکوپ، چنین آماده سازی باید قبل از شستشو در محلول ضد عفونی کننده (ضدعفونی کننده) نگهداری شود.

آماده سازی آماده سازی "نقطه" روش دیگر

آماده سازی آماده سازی "اسمیر ثابت".

برای تهیه این آماده سازی، باید یک قطره آب را روی یک لام شیشه ای بدون چربی بچکانید.

ماده ای را که آزمایش می کنید با استفاده از یک حلقه بیولوژیکی وارد آن کنید و آن را به گونه ای توزیع کنید که یک اسمیر نازک و یکنواخت با قطر تقریباً 1-1.5 سانتی متر بدست آید (فقط با چنین توزیعی از مواد می توان سلول های باکتریایی جدا شده را در آن مشاهده کرد. اسمیر).

اگر ماده آزمایشی در یک محیط مایع قرار داشته باشد، مستقیماً با یک حلقه روی یک لام شیشه ای اعمال می شود و یک اسمیر آماده می شود. اسمیرها در هوا یا در جریان هوای گرم روی شعله مشعل خشک می شوند.


برای رفع لکه، یک لام شیشه ای (با اسمیر بالا) با دقت و به آرامی 3 بار (فقط به مدت 3 ثانیه) از شعله مشعل عبور داده می شود. میکروارگانیسم‌های موجود در اسمیر وقتی ثابت می‌شوند می‌میرند، محکم به سطح لام شیشه‌ای می‌چسبند و در طول پردازش بیشتر دارو شسته نمی‌شوند.

1. آماده!

توجه!گرمایش طولانی تر ممکن است باعث تغییر شکل ساختارهای سلولی شود. اسمیر خون، اسمیر اندام ها و هر بافت و (در برخی موارد، اسمیر از فرهنگ) با غوطه وری به مدت 5-20 دقیقه در متیل بلو یا الکل اتیلیک، مخلوط نیکیفوروف، همچنین الکل سابلیمیت یا سایر مایعات تثبیت کننده ثابت می شود.

نمونه هایی از میکرواسلایدها برای میکروسکوپ

گیاه شناسی و جانورشناسی:

پوست پیاز
دانه چاودار
کلاهک ریشه
شاخه لیندن
بساک
تخمدان
کاملیا
اپیدرم برگ شمعدانی
اندام زنبور عسل
بال زنبور
سیکلوپ
ولووکس
اوگلنا
دمپایی دمپایی
کرم خاکی (مقطع)
اجزای دهان یک پشه
آسکاریس
دافنی

زیست شناسی و فیزیولوژی:

جهش مگس سرکه (شکل بدون بال)
جهش مگس سرکه (سیاه بدن)
"هنجار" مگس سرکه
سلول حیوانی
سلول گیاه
قالب موکور
خرد کردن تخمک
میتوز در ریشه پیاز
ماهیچه های مخطط
اسپرم پستانداران
عصب ( مقطع عرضی )
بافت همبند سست
تخم پستاندار
سلول های عصبی
غضروف شفاف
عضله صاف
استخوان
خون قورباغه
خون انسان
اپیتلیوم تک لایه

هر چیزی که در دست است معنی ندارد که روی صحنه بگذاریم و سعی کنیم از طریق چشمی میکروسکوپ بررسی کنیم. به عنوان مثال، دیدن اجسام مات (انگشت، سکه) امکان پذیر نخواهد بود و حتی یک ذره بین قوی برای مشاهده کافی است.

معمولاً از ریز آماده‌سازی‌های مخصوص برای میکروسکوپ استفاده می‌شود. هنگام تهیه میکرو اسلاید، یک اسلاید شیشه ای (اندازه 25 × 75 میلی متر) گرفته می شود که جسم مورد نظر روی آن قرار می گیرد. معمولاً برای حفظ بهتر و سهولت استفاده، روی جسم را با یک شیشه پوششی نازک (اندازه 18 × 18 میلی متر) می پوشانند.

بر اساس روش تهیه و زمان نگهداری، آنها به موارد زیر تقسیم می شوند:

• داروهای دائمی- جسم در یک محیط سخت کننده شفاف (معمولاً بلسان کانادایی) قرار می گیرد و با یک لپه پوشانده می شود. چنین آماده سازی ها را می توان برای سال ها و دهه ها ذخیره کرد، اما آماده سازی آنها بسیار کار فشرده است (شیء باید با دقت آماده شود: آبگیری، رنگ آمیزی، و غیره).
• داروهای موقت- جسم در یک محیط مایع (آب، محلول نمکی، گلیسیرین-ژلاتین و غیره) قرار می گیرد، چنین آماده سازی ها برای چند ساعت استفاده مناسب هستند، اما می توان آزمایش هایی را با آنها انجام داد (به عنوان مثال، جایگزینی آب با نمک نمک). محلول با غلظت معین، افزودن رنگ و غیره.

داروی دائمی

جدول انواع داروها را بسته به ماهیت شی مورد مطالعه نشان می دهد.

		شرح	دائمی/موقت	مثال
	کل دارو	کل ارگانیسم یا قسمت های کوچک آن (دست و پا، قسمت های دهان). معمولاً نیاز به پردازش (سبک شدن) دارند	دائمی، موقت
		جسم را داخل یک ماده پلاستیکی (پارافین، اکریلیک) می ریزند و پس از سفت شدن، با استفاده از میکروتوم (دستگاهی برای به دست آوردن مقاطع نازک) به صفحات نازک بریده می شود.	معمولا دائمی است
		آماده سازی برش جریان بدون شیشه پوششی (معمولاً آماده سازی خون): یک قطره شیشه صیقلی را در یک لایه نازک روی سطح لام می مالند و خشک می کنند.	موقت، کمتر دائمی
		یک صفحه نازک (0.03-0.02 میلی متر ضخامت) از سنگ یا سایر نمونه های سخت (استخوان، فسیل) چسبانده شده به شیشه پوشش	ثابت

در برخی موارد، آماده سازی موقت را می توان مستقیماً بدون پوشش با ورقه ی پوششی مشاهده کرد. تقریباً غیرممکن خواهد بود که چنین آماده سازی را به طور همزمان مشاهده کنید - بخشی از آن در کانون توجه قرار می گیرد، اما بقیه نه. اما اگر چنین آماده سازی را با میکروسکوپ با بزرگنمایی کم بررسی کنید، می توانید اشیاء جالبی را مشاهده کنید.

همچنین، در قالب آماده سازی موقت باز، می توانید کریستال های نمک های مختلف (اسید استیل سالیسیلیک یا آسپرین؛ سولفات مس یا سولفات مس؛ نمک قرمز خون یا هگزاسیانوفرات پتاسیم) را پرورش دهید. چند قطره از محلول نمک آبی یا الکلی روی سطح از قبل تمیز شده از گرد و غبار و اثر انگشت ریخته می شود (برای کیفیت بهتر کریستالی، بهتر است ابتدا محلول را فیلتر کنید، زیرا این کار باعث کاهش تعداد نقاط تبلور و به دست آوردن بزرگتر می شود. کریستال های دقیق تر). قطره ها اجازه داده می شوند تا خشک شوند (شما می توانید آزمایشی را با یکی از لیوان ها با حرارت دادن آن به منظور تسریع تبخیر انجام دهید و به دیگری اجازه دهید تا حلال را تبخیر کند و کریستال ها خود به خود بریزند). شما همچنین می توانید یک میکرونمونه نیمه تمام را در مرحله فرآیند کریستالیزاسیون بررسی کنید: می توانید ببینید که چگونه کریستال درست جلوی چشمان شما رشد می کند یا چگونه یک جریان مایع در اطراف جنین یک ماده جامد به دلیل تفاوت در غلظت یون رخ می دهد.

یک روش ساده و مؤثر برای ساخت ریزآماده‌های بدون بخش، که به شما امکان می‌دهد تسکین سطح شی مورد مطالعه (به عنوان مثال، برگ گیاه، پوشش بدن حشره) را بررسی کنید - روش ماکت ها. این شامل گرفتن یک شی (مانند یک برگ گیاه) و استفاده از یک لایه نازک از لاک ناخن شفاف روی آن است (یک لکه کوچک به ابعاد 5×10 میلی متر کافی است). پس از خشک شدن لاک (پس از حدود 5-7 دقیقه)، یک تکه نوار چسب به لکه لاک چسبانده می شود. به این ترتیب ماکت جدا می شود و پس از آن روی یک اسلاید شیشه ای قرار می گیرد و زیر میکروسکوپ بررسی می شود.

1.1. تهیه یک آماده سازی موقت

تکنیک تهیه یک آماده سازی موقت از آزمایشات مدرسه با پوست پیاز به خوبی شناخته شده است. اسلاید را روی میز قرار دهید (اسلایدها همیشه توسط لبه های کناری اسلاید نگه داشته می شوند). 1-2 قطره آب و شی مورد مطالعه را در مرکز لیوان قرار می دهیم.شیشه روکش را از لبه های کناری گرفته و با دقت روی قطره را با جسم بالا می پوشانیم. بهتر است شیشه روکش را روی یکی از وجوه روی جسم قرار دهید و به آرامی زاویه بین لیوان ها را کم کنید تا قطره با جسم پوشانده شود. این امر احتمال ایجاد حباب های هوا را کاهش می دهد.

1.2. تهیه اسمیر خون

اسمیر خون برای آزمایش خون به شرح زیر تهیه می شود.

گام	شرح	عکس
	قطره کوچکی از خون را روی یک لام شیشه ای که روی سطح افقی قرار دارد، با استفاده از یک پیپت مویرگی شیشه ای بریزید (یا مستقیماً از محل نیش انگشت، قطره خون بیرون زده را به انتهای یک لام شیشه ای استریل منتقل کنید، مراقب باشید که به آن دست نزنید. شیشه با ناحیه سوراخ شده پوست).
	یک شیشه زمین تمیز با یک لبه کوتاه با زاویه 45 درجه نسبت به لغزش در لبه قطره قرار می گیرد. منتظر می مانیم تا خون زیر لبه لیوان پخش شود.
	به محض اینکه خون روی دنده پخش شد، قطره را به سرعت در امتداد لام حرکت دهید. نباید شیشه را محکم فشار دهید، زیرا ممکن است سلول های خونی را از بین ببرد.
	پس از آماده شدن، اسمیر به سرعت در هوا خشک می شود تا زمانی که با نگه داشتن آن روی آباژور یا تکان دادن آن در هوا، درخشش مرطوب از بین برود. یک اسمیر خوب ساخته شده نازک، به رنگ زرد است و به یک "پانیکل" ختم می شود. خطوط متراکم صورتی و قرمز مناسب نیستند، زیرا بسیار ضخیم هستند و تشخیص عناصر سلولی دشوار خواهد بود.

تصاویر و توضیحات از microtome.info/documents/micropreparaty.html.

2. برخی از ویژگی های میکروسکوپ

استفاده از میکروسکوپ در بزرگنمایی کم و زیاد در آزمایشات مدرسه کاملاً شناخته شده است و به مهارت های پیچیده خاصی نیاز ندارد.

2.1. لنز غوطه وری

اگر یک میکروسکوپ با هدف غوطه وری دارید (که دارای علامت 100× MI و یک حلقه سیاه است و دارای قسمت متحرک عدسی رو به نمونه میکروسکوپی است)، در این صورت این فرصت را دارید که اجسام را با بزرگنمایی بالا بررسی کنید (اما استفاده از اسمیر برای این کار منطقی است).

روش کار با لنز غوطه ور روغن به شرح زیر است.

1. عدسی خشک را از مسیر پرتو خارج کنید (درام لنز را بچرخانید تا هیچ عدسی رو به نمونه نباشد).
2. یک قطره روغن غوطه وری (سدر) را روی آماده سازی بمالید. همچنین توصیه می شود عدسی این لنز را با روغن غوطه وری کمی چرب کنید.
3. با چرخاندن درام لنز، لنز غوطه وری را در مسیر پرتو قرار دهید (تا زمانی که در جای خود کلیک کند).
4. لنز را پایین بیاورید تا یک قطره روغن غوطه وری را لمس کند، سپس در حین مشاهده از طریق میکروسکوپ، فوکوس را با استفاده از پیچ های فوکوس درشت و ظریف تنظیم کنید.

هنگام کار با لنز غوطه وری، حداکثر روشنایی مورد نیاز است. پس از اتمام مطالعه، لنز غوطه وری باید با یک پارچه نوری نرم یا پارچه کامبریک، کمی با مایع مخصوص برای تمیز کردن اپتیک مرطوب شود. مهم: هر نوع لنز دیگری را نمی توان پاک کرد!

استفاده از مایعات روغنی دیگر به جای روغن سدر توصیه نمی شود، زیرا اگر ضریب شکست غوطه وری مورد استفاده (مثلا روغن وازلین با ضریب 1.48162) با ضریب شکست روغن سرو (شاخص 1.515) متفاوت باشد، کاهش می یابد. در مقابل، تصویر تار، و وضوح.

2.2. عکس در نور مایل و میدان تاریک

برای آماده سازی حجمی (کل آماده سازی حشرات، جلبک ها و غیره) استفاده از نورپردازی متفاوت با نورهای نیمه شفاف معمولی جالب است. برای تنظیم روشنایی در میکروسکوپ ها، از یک کندانسور استفاده می شود - یک دستگاه چرخان با سوراخ هایی با قطرها و مکان های مختلف. با استفاده از گزینه های خازن مخصوص، می توانید ماهیت روشنایی آماده سازی را تغییر دهید و بر حجم جسم مورد نظر تأکید کنید.

جدول کار با انواع مختلف نور را مقایسه می کند.

	نوع روشنایی	روش ایجاد	نمای مردمک عدسی با برداشتن چشمی	مثال
	معمولی (نیمه شفاف)	نور به طور مساوی از میدان دید عبور می کند.