Mikroskopia doma. Pravidlá prípravy mikrosklíčok Urob si sám vzorky pre mikroskop

Stanislav Yablokov, Jaroslavľská štátna univerzita. P. G. Demidová

Už sú to dva roky, čo doma pozorujem mikrokozmos a rok, čo ho natáčam kamerou. Počas tejto doby som na vlastné oči videl, ako vyzerajú krvinky, šupiny padajúce z krídel motýľov a ako bije srdce slimáka. Samozrejme, veľa sa dalo naučiť z učebníc, videoprednášok a tematických webov. Ale zároveň by tam nebol pocit prítomnosti, blízkosti k niečomu, čo nie je viditeľné voľným okom. Že to nie sú len slová z knihy, ale osobná skúsenosť. Zážitok, ktorý je dnes dostupný každému.

Cibuľová šupka. Zväčšenie 1000×. Farbenie jódom. Na fotografii je bunkové jadro.

Cibuľová šupka. Zväčšenie 1000×. Farbenie azur-eozínom. Na fotografii je v jadre viditeľné jadierko.

Zemiak. Modré škvrny sú škrobové zrná. Zväčšenie 100x. Farbenie jódom.

Film na chrbte švába. Zväčšenie 400×.

Slivková kôra. Zväčšenie 1000×.

Krídlo bibionidného chrobáka. Zväčšenie 400×.

Krídlo motýľa hlohu. Zväčšenie 100x.

Váhy z krídel molí. Zväčšenie 400×.

Chloroplasty v bunkách trávy. Zväčšenie 1000×.

Baby slimák. Zväčšenie 40×.

Ďatelinový list. Zväčšenie 100x. Niektoré bunky obsahujú tmavočervený pigment.

Jahodový list. Zväčšenie 40×.

Chloroplasty v bunkách rias. Zväčšenie 1000×.

Krvný náter. Farbenie azúrovo-eozínom podľa Romanovského. Zväčšenie 1000×. Na fotografii: eozinofil na pozadí červených krviniek.

Krvný náter. Farbenie azúrovo-eozínom podľa Romanovského. Zväčšenie 1000×. Na fotografii: vľavo - monocyt, vpravo - lymfocyt.

Čo kúpiť

Divadlo začína vešiakom a mikrofotografia začína nákupom vybavenia a predovšetkým mikroskopu. Jednou z jeho hlavných charakteristík je súbor dostupných zväčšení, ktoré sú určené súčinom zväčšení okuláru a šošovky.

Nie každá biologická vzorka je vhodná na pozorovanie pri veľkom zväčšení. Je to spôsobené tým, že čím väčšie je zväčšenie optickej sústavy, tým menšia je hĺbka ostrosti. V dôsledku toho bude obraz nerovných povrchov prípravku čiastočne rozmazaný. Preto je dôležité mať sadu šošoviek a okulárov, ktoré umožňujú vykonávať pozorovania so zväčšením od 10-20 do 900-1000×. Niekedy je opodstatnené dosiahnuť 1500x zväčšenie (15 okulár a 100x objektív). Väčšie zväčšenie je zbytočné, pretože vlnový charakter svetla nám neumožňuje vidieť jemnejšie detaily.

Ďalším dôležitým bodom je typ okuláru. „Koľkými očami“ chcete vidieť obrázok? Zvyčajne existujú monokulárne, binokulárne a trinokulárne odrody. V prípade monokuláru budete musieť pri dlhšom pozorovaní žmúriť, čo unavuje oko. Pozerajú do ďalekohľadu oboma očami (netreba si ho zamieňať so stereomikroskopom, ktorý poskytuje trojrozmerný obraz). Na snímanie fotografií a videí mikroobjektov budete potrebovať „tretie oko“ - prílohu na inštaláciu zariadenia. Mnoho výrobcov vyrába špeciálne kamery pre svoje modely mikroskopov, ale môžete použiť aj bežnú kameru, ak si k nej zakúpite adaptér.

Pozorovanie pri veľkých zväčšeniach vyžaduje dobré osvetlenie kvôli malej apertúre šošoviek. Svetelný lúč z iluminátora, prevedený do optického zariadenia - kondenzora, osvetľuje prípravok. V závislosti od charakteru osvetlenia existuje niekoľko metód pozorovania, z ktorých najbežnejšie sú metódy svetlého a tmavého poľa. V prvom, najjednoduchšom, mnohým známym zo školy, je preparát zospodu rovnomerne osvetlený. V tomto prípade sa cez opticky priehľadné časti prípravku šíri svetlo do šošovky, v nepriehľadných častiach sa pohltí a rozptýli. Tmavý obraz sa získa na bielom pozadí, odtiaľ názov metódy. S tmavým kondenzátorom je všetko inak. Z neho vychádzajúci svetelný lúč má tvar kužeľa, lúče nevstupujú do šošovky, ale sú rozptýlené na nepriehľadnej vzorke, a to aj v smere šošovky. Výsledkom je, že na tmavom pozadí je viditeľný svetlý objekt. Táto metóda pozorovania je vhodná na štúdium transparentných objektov s nízkym kontrastom. Preto, ak plánujete rozšíriť škálu metód pozorovania, mali by ste si vybrať modely mikroskopov, ktoré umožňujú inštaláciu dodatočného vybavenia: kondenzátor tmavého poľa, clona pre tmavé pole, zariadenia na fázový kontrast, polarizátory atď.

Optické systémy nie sú ideálne: prechod svetla cez ne je spojený s deformáciami obrazu – aberáciami. Šošovky a okuláre sa preto snažia vyrobiť tak, aby tieto aberácie boli čo najviac eliminované. To všetko ovplyvňuje ich konečnú cenu. Z dôvodu ceny a kvality má zmysel kupovať planárne achromatické šošovky na odborný výskum. Silné objektívy (napr. 100-násobné zväčšenie) majú NA väčšiu ako 1 pri použití imerzie, oleja s vysokým indexom lomu, glycerolového roztoku (pre UV oblasť) alebo len vody. Ak teda okrem „suchých“ šošoviek beriete aj imerzné šošovky, mali by ste sa o imerznú kvapalinu postarať vopred. Jeho index lomu musí zodpovedať konkrétnej šošovke.

Niekedy by ste mali venovať pozornosť dizajnu tabuľky predmetov a rukovätí na jej ovládanie. Oplatí sa vybrať aj typ iluminátora, ktorým môže byť bežná žiarovka alebo LED, ktorá je jasnejšia a menej sa zahrieva. Mikroskopy majú tiež individuálne vlastnosti. Každá ďalšia možnosť je pripočítaním k cene, takže výber modelu a konfigurácie zostáva na spotrebiteľovi.

Dnes často kupujú lacné mikroskopy pre deti, monokuláry s malou sadou šošoviek a skromnými parametrami. Môžu poslúžiť ako dobrý východiskový bod nielen pre objavovanie mikrosveta, ale aj pre oboznámenie sa so základnými princípmi mikroskopu. Potom by si dieťa malo kúpiť vážnejšie zariadenie.

Ako sa pozerať

Môžete si kúpiť súpravy hotových liekov, ktoré nie sú ani zďaleka lacné, ale potom pocit osobnej účasti na štúdii nebude taký živý a skôr či neskôr budú nudné. Preto treba dávať pozor ako na objekty na pozorovanie, tak aj na dostupné prostriedky na prípravu preparátov.

Pozorovanie v prechádzajúcom svetle predpokladá, že skúmaný objekt je dosť tenký. Dokonca aj šupka bobúľ alebo ovocia je príliš hrubá, takže rezy sa skúmajú pod mikroskopom. Doma sa vyrábajú obyčajnými žiletkami. Aby nedošlo k rozdrveniu šupky, je umiestnená medzi kúsky korku alebo naplnená parafínom. S určitou zručnosťou môžete dosiahnuť hrúbku rezu niekoľkých vrstiev buniek, ale ideálne by ste mali pracovať s jednobunkovou vrstvou tkaniva – niekoľko vrstiev buniek vytvára neostrý, chaotický obraz.

Testovaný prípravok sa umiestni na podložné sklíčko a v prípade potreby sa prikryje krycím sklíčkom. Okuliare si môžete kúpiť v obchode so zdravotníckym vybavením. Ak prípravok nedrží dobre na skle, zafixuje sa miernym navlhčením vodou, imerzným olejom alebo glycerínom. Nie každý liek okamžite odhalí svoju štruktúru, niekedy mu treba „pomôcť“ tónovaním jeho vytvorených prvkov: jadier, cytoplazmy, organel. Dobrými farbivami sú jód a brilantná zelená. Jód je pomerne univerzálne farbivo, možno ním farbiť široké spektrum biologických prípravkov.

Pri výjazde do prírody by ste sa mali zásobiť dózami na zachytávanie vody z najbližšej vodnej plochy a malými vrecúškami na lístie, zaschnuté zvyšky hmyzu atď.

Čo sledovať

Mikroskop je zakúpený, nástroje sú zakúpené - je čas začať. A začať by ste mali tým najdostupnejším – napríklad cibuľovými šupkami. Tenká sama o sebe, sfarbená jódom, odhaľuje vo svojej štruktúre jasne rozlíšiteľné bunkové jadrá. Tento experiment, dobre známy zo školy, stojí za to urobiť ako prvý. Cibuľová šupka by sa mala na 10-15 minút poliať jódom, potom opláchnuť pod tečúcou vodou.

Okrem toho sa jód môže použiť na farbenie zemiakov. Rez musí byť čo najtenší. Doslova 5-10 minút jeho prítomnosti v jóde odhalí vrstvy škrobu, ktoré zmodrajú.

Na balkónoch sa často hromadí veľké množstvo mŕtvol lietajúceho hmyzu. Neponáhľajte sa ich zbaviť: môžu slúžiť ako cenný materiál pre výskum. Ako môžete vidieť z fotografií, zistíte, že hmyz má na krídlach chĺpky, ktoré ho chránia pred navlhnutím. Vysoké povrchové napätie vody nedovolí, aby kvapka „prepadla“ cez chĺpky a dotkla sa krídla.

Ak ste sa niekedy dotkli krídla motýľa alebo nočného motýľa, pravdepodobne ste si všimli, že z neho odlietava nejaký „prach“. Fotografie jasne ukazujú, že nejde o prach, ale o šupiny z krídel. Majú rôzne tvary a dajú sa celkom ľahko odlepiť.

Okrem toho môžete pomocou mikroskopu študovať štruktúru končatín hmyzu a pavúkov a skúmať napríklad chitínové filmy na chrbte švábov. A pri správnom zväčšení sa uistite, že takéto filmy pozostávajú z tesne susediacich (možno zrastených) šupín.

Nemenej zaujímavým objektom na pozorovanie je šupka bobúľ a ovocia. Avšak buď jeho bunková štruktúra môže byť nerozoznateľná, alebo jej hrúbka neumožní jasný obraz. Tak či onak, kým získate dobrú prípravu, budete musieť urobiť veľa pokusov: pretriediť rôzne odrody hrozna, aby ste našli také, v ktorom by mali farbiace látky šupky zaujímavý tvar, alebo urobte niekoľko častí šupky. slivka, čím sa dosiahne jednobunková vrstva. V každom prípade bude odmena za vykonanú prácu hodná.

Tráva, riasy a lístie sú ešte dostupnejšie pre výskum. Ale napriek ich rozšírenému výskytu môže byť výber a príprava dobrej drogy z nich ťažký. Najzaujímavejšou vecou na zeleni sú asi chloroplasty. Preto musí byť rez extrémne tenký.

Zelené riasy, ktoré sa nachádzajú v akýchkoľvek otvorených vodných útvaroch, majú často prijateľnú hrúbku. Nájdete tu aj plávajúce riasy a mikroskopických vodných obyvateľov - nedospelé slimáky, dafnie, améby, kyklopy a papuče. Malé mláďa slimáka, opticky priehľadné, umožňuje vidieť tlkot jeho srdca.

Váš vlastný výskumník

Po preštudovaní jednoduchých a dostupných drog budete chcieť skomplikovať techniku pozorovania a rozšíriť triedu skúmaných objektov. Na to budete potrebovať špeciálnu literatúru a špecializované nástroje, špecifické pre každý typ objektu, ale stále majú určitú univerzálnosť. Napríklad metóda Gramovho farbenia, kde sa rôzne druhy baktérií začínajú odlišovať farbou, sa dá aplikovať aj na iné, nebakteriálne bunky. Blízka je mu aj metóda farbenia krvných náterov podľa Romanovského. Na predaj je hotové tekuté farbivo aj prášok pozostávajúci z jeho zložiek - azúru a eozínu. Dajú sa kúpiť v špecializovaných predajniach alebo objednať online. Ak nemôžete získať farbivo, môžete požiadať laboratórneho asistenta, ktorý vám robí krvný test na klinike, o kúsok skla s škvrnou.

V pokračovaní témy výskumu krvi treba spomenúť Gorjajevovu komoru – prístroj na počítanie počtu krviniek a odhad ich veľkosti. Metódy na štúdium krvi a iných tekutín pomocou Goryaevovej kamery sú opísané v odbornej literatúre.

V modernom svete, kde sú rôzne technické prostriedky a zariadenia v dochádzkové vzdialenosti, sa každý rozhoduje sám, na čo utratí svoje peniaze. Môže to byť drahý notebook alebo televízor s prehnanou veľkosťou uhlopriečky. Sú aj takí, ktorí odvrátia pohľad od obrazoviek a nasmerujú ho ďaleko do vesmíru kúpou ďalekohľadu. Mikroskopia sa môže stať zaujímavým koníčkom a pre niekoho dokonca umením, prostriedkom sebavyjadrenia. Pri pohľade cez okulár mikroskopu prenikáme hlboko do prírody, ktorej súčasťou sme aj my sami.

„Veda a život“ o mikrofotografii:

Mikroskop "Analit" - 1987, č. 1.

Oshanin S.L. S mikroskopom pri jazierku. - 1988, č.8.

Oshanin S. L. Život svetu neviditeľný. - 1989, č. 6.

Miloslavský V. Ju. - 1998, č. 1.

Mologina N. - 2007, č. 4.

Slovník k článku

Clona- skutočný otvor optickej sústavy, určený rozmermi zrkadiel, šošoviek, clon a iných častí. Uhol α medzi vonkajšími lúčmi kužeľového svetelného lúča sa nazýva uhlová apertúra. Numerická apertúra A = n sin(α/2), kde n je index lomu prostredia, v ktorom sa nachádza objekt pozorovania. Rozlíšenie zariadenia je úmerné A, osvetlenie obrazu je A2. Na zvýšenie clony sa používa ponorenie.

Ponorenie- priehľadná kvapalina s indexom lomu n > 1. Vzorka a šošovka mikroskopu sú do nej ponorené, čím sa zväčší jej clona a tým sa zvýši jej rozlišovacia schopnosť.

Planachromatická šošovka- šošovka s korigovanou chromatickou aberáciou, ktorá vytvára plochý obraz cez celé pole. Bežné achromáty a apochromáty (aberácie korigované na dve a tri farby, v tomto poradí) poskytujú zakrivené pole, ktoré sa nedá korigovať.

Fázový kontrast- metóda mikroskopického výskumu založená na zmene fázy svetelnej vlny prechádzajúcej cez priehľadný prípravok. Fáza kmitania nie je viditeľná voľným okom, preto špeciálna optika – kondenzor a šošovka – premieňa fázový rozdiel na negatívny alebo pozitívny obraz.

Monocyty- jedna z foriem bielych krviniek.

Chloroplasty- zelené organely rastlinných buniek zodpovedné za fotosyntézu.

Eozinofily- krvinky, ktoré hrajú ochrannú úlohu pri alergických reakciách.

Pri výrobe dočasných mikrosklíčok je potrebné dodržať nasledujúcu postupnosť operácií:

1. Podložné a krycie sklíčko umyte a dôkladne osušte. Aby ste neporušili veľmi krehké krycie sklíčko, vložte ho do záhybu obrúska medzi palec a ukazovák pravej ruky a krúživými pohybmi prstov ho jemne utrite.
2. Naneste kvapku tekutiny (voda, glycerín, roztok, činidlo alebo farbivo) na sklíčko pomocou pipety.
3. Pomocou čepele urobte rez skúmaným orgánom. Čepeľ musí byť veľmi ostrá.
4. Vyberte najtenšiu časť a preneste ju pomocou pitevnej ihly alebo tenkej kefy do stredu podložného sklíčka do kvapky tekutiny.
5. Sekciu prikryte krycím sklom, aby sa pod ňu nedostal vzduch. Za týmto účelom uchopte krycie sklo za okraje dvoma prstami a spodný okraj prisuňte šikmo k okraju kvapky kvapaliny a hladko ho spustite.
6. Ak je tekutiny veľa a vyteká spod krycieho skla, odstráňte ju pomocou filtračného papiera. Ak sú pod krycím sklom priestory naplnené vzduchom, pridajte tekutinu tak, že jej kvapku dáte blízko okraja krycieho skla a na opačnú stranu filtračný papier.

Učitelia biológie a vedúci krúžkov skôr či neskôr stoja pred úlohou zhotoviť výučbovú mikrosklíčko. Aký druh látky je schopný fixovať biologický objekt na dlhú dobu a ako urobiť tento postup jednoduchým a dostupným. Známe balzamy (fixačné živice) neboli nikdy považované za ľahko dostupné látky, najmä ďaleko od veľkých miest. Okrem toho hovoria, že tieto látky nie sú neškodné. A nakoniec, proces ich používania je dosť ťažký.

Na výrobu lieku môžete použiť lepidlo PVA. Dôležité je, aby bol prípravok vlhký, dobre navlhčený a lepidlo čerstvé a mierne zriedené čistou studenou prevarenou vodou na požadovanú koncentráciu (lepidlo je emulzia a ľahko sa riedi). Po niekoľkých pokusoch a omyloch je možné bez problémov zostaviť a určiť požadovanú koncentráciu.

Potom sa na čisté sklíčko nanesie kvapka vody – prevarenej alebo destilovanej. Vodu treba opatrne odstrániť čistou handričkou bez chĺpkov alebo filtračným papierom, aby bolo sklo mierne vlhké. To, ako aj vlhkosť vzorky, podporuje rovnomerné (bezbublinové) zmáčanie. Naneste malú kvapku vopred pripraveného PVA lepidla na pripravený povrch tak, aby nevznikli vzduchové bubliny. Niekedy nezasahujú, ale kazia vzhľad drogy. Do tejto kvapky sa opatrne prenesie vopred pripravený rez alebo vzorka, napríklad dafnia predtým usmrtená horúcou vodou. Potom plynulým nakloneným pohybom položte na vrch krycie sklo, tiež čisté a mierne vlhké. Vrstva lepidla medzi sklami by mala byť čo najtenšia.

Ak sa niečo nepodarí a vzorka je hodnotná a dostatočne veľká, takmer vždy, na rozdiel od živíc, je možné ju umyť obyčajnou vodou a postup zopakovať. Prebytočné lepidlo sa opatrne umyje tenkým prúdom vody; treba dbať na to, aby netečie medzi poháre. Krycie sklo treba držať. Mierne zakalené zvyšky vody je možné opatrne odstrániť filtračným papierom alebo prúžkom tenkej látky, ktorá nepúšťa vlákna. biologický spôsob prípravy mikrosklíčka

Pripravené prípravky by mali byť položené na teplom a suchom mieste. Ukazovateľom pripravenosti lieku je jeho transparentnosť. V závislosti od mnohých faktorov trvá sušenie do priehľadného stavu jeden až štyri týždne. Stáva sa, že príliš hrubá vrstva lepidla alebo lepidlo znečistené nečistotami úplne nespriehľadní – to trochu znehodnocuje obraz, ale vďaka malej hĺbke ostrosti mikroskopu sú aj takéto prípravky dostupné na štúdium.

Nie je zaručené, že tento spôsob je možné použiť na výrobu akýchkoľvek prípravkov, pretože niektoré vyžadujú farbenie a farbivá môžu reagovať s lepidlom.

T.N. Lashkina, učiteľka biológie a ekológie na strednej škole č. 23, z mesta Syzran, ponúka nasledujúcu metódu prípravy mikrosklíčok. Môžete si vziať obyčajnú želatínu a naplniť ju vodou, aby napučala. Potom naberte do polievkovej lyžice trochu napučanej želatíny (bez vody) a zohrejte na ohni. Keď sa želatína rozpustí (nechcete, aby sa uvarila), dajte ju na podložné sklíčko. Vložte vzorku do tejto kvapky a prikryte ju krycím sklíčkom; prstom ju dobre zatlačte, aby sa želatína rovnomerne rozdelila. Mikroprípravok je pripravený.

Ak nie sú k dispozícii krycie sklíčka, namiesto krycieho sklíčka je možné použiť celofán. Celofán má navyše jednu výhodu: mikroprípravok sa nedá rozdrviť, pretože Celofán je elastický a nepraská ako krycie sklo.

So želatínou treba pracovať rýchlo, inak stuhne. Ale ak sa to stane, stačí držať pohár nad ohňom a želatína sa znova stane tekutou. Želatína je neškodná, dostupná a veľmi ekonomická.

Štátna rozpočtová vzdelávacia inštitúcia

Vyššie odborné vzdelanie

"Bashkir State Medical University"

Ministerstvo zdravotníctva a sociálneho rozvoja

Ruská federácia

Katedra farmakognózie s kurzom botaniky a základov bylinkárstva

"9" _ septembra _____2012

Disciplína BotanikaŠpecialita 060301 Lekáreň

Dobre 1 (oddelenie na plný úväzok) semester 1

Časť: „Náuka o bunke. Ergastické a sekrečné látky v rastlinnej bunke"

Laboratórna práca č.1

Na tému: „Optické mikroskopy. Vlastnosti botanickej mikrotechnológie. Osmotické vlastnosti rastlinnej bunky"

Laboratórna práca č.2

Na tému: „Štruktúra bunkovej steny. Plastidy, rezervné a minerálne inklúzie"

študentov

Ufa 2012
Laboratórna práca č.1

Téma hodiny: „Optické mikroskopy. Vlastnosti botanickej mikrotechnológie. Osmotické vlastnosti rastlinnej bunky"

1. Relevancia.Štúdium techník botanickej mikrotechnológie je nevyhnutnou podmienkou na zvládnutie praktických zručností v časti „Cytológia, histológia a anatómia rastlín“. Štúdium štruktúry rastlinnej bunky a jej osmotických vlastností dáva predstavu o bunkovej organizácii rastlinných organizmov, štrukturálnych vlastnostiach a rozdieloch od zvierat.

2. Ciele lekcie:

1. Získať zručnosti v práci s mikroskopom;

2. Nadobudnúť zručnosti pri príprave dočasných mikrosklíčok

3. Získať zručnosti v botanickej mikrotechnológii pre mikroskopickú analýzu celých, rezaných a práškových liečivých rastlinných materiálov;

4. Študujte štrukturálne znaky rastlinnej bunky

5. Študujte vlastnosti rastlinnej bunky

vedieť :

· prístroj mikroskopu a pravidlá práce s ním;

· história štúdia buniek, postuláty bunkovej teórie;

· štruktúra prokaryotickej bunky;

· štruktúra eukaryotickej bunky, jej hlavné organely;

· štruktúrne znaky rastlinnej bunky.

Na rozvoj odborných kompetencií musí študent byť schopný :

· pripraviť mikrosklíčko;

· skúmať mikroskopický preparát pod mikroskopom s malým a veľkým zväčšením;

· nájsť bunkové orgány;

· vykonať reakcie plazmolýzy a deplazmolýzy, uviesť teoretické zdôvodnenie;

Na rozvoj odbornej spôsobilosti musí študent vlastné :

· botanický pojmový aparát;

· technika mikroskopie a histochemická analýza mikropreparátov rastlinných objektov.

3. Požadované základné znalosti a zručnosti:

· moderné predstavy o stavbe prokaryotických a eukaryotických buniek, ich rozdieloch.

mikroskopické zariadenie.

4. Trvanie mimopracovnej práce– 2 akademické hodiny (90 min).

Otázky pre samoukov:

1. Mikroskop. Mechanické a optické systémy.

2. Pravidlá pre prácu s mikroskopom

3. Pracovná vzdialenosť. Rozhodnutie. Všeobecné zvýšenie.

4. Klietka. História štúdia. Bunková teória

5. Rozdiel medzi rastlinnou bunkou a bunkou huby a živočíchov

6. Štruktúra bunky. Jadro, štruktúra, funkcie.

7. Organely rastlinných buniek. Štruktúra, funkcie

8. Cytoplazma. Štruktúra, funkcie

9. Vakuola, štruktúra, funkcie

Vysvetlenie úloh

Mikroskop.

Mikroskop je opticko-mechanický systém, ktorý umožňuje získať vysoko zväčšené obrazy predmetov, ktorých rozmery sú ďaleko za rozlíšením voľného oka. Rozlíšenie oka je 0,15 mm. Rozlíšenie svetelných mikroskopov je 300-400-krát vyššie ako rozlíšenie voľného oka a rovná sa 0,1-0,3 mikrónu.

Mikroskop rozlišuje medzi optickými a mechanickými systémami. Optický systém pozostáva z osvetľovacieho prístroja, šošovky a okuláru. Mechanický systém pozostáva z revolvera, trubice, statívu, stolíka, makro a mikroskrutiek.

Osvetľovacie zariadenie obsahuje:

Kondenzátor (navrhnutý pre najlepšie osvetlenie, nastavenie ostrosti obrazu);

Irisová clona (určená na reguláciu priemeru svetelného lúča a hĺbky zorného poľa);

Zrkadlo (určené na nasmerovanie lúčov zo zdroja svetla do kondenzora).

Objektív je najdôležitejšou súčasťou optického systému. Šošovka vytvára obraz objektu s opačným usporiadaním častí. Zároveň odhaľuje („rozrieši“) štruktúry, ktoré sú voľným okom neprístupné.

Okulár slúži na pozorovanie obrazu vytvoreného šošovkou. Apertúra okuláru určuje hranice zorného poľa. Vo všeobecnosti šošovka a okulár poskytujú rozlíšenie mikroskopu a určujú celkové zväčšenie mikroskopu (celkové zväčšenie mikroskopu je definované ako súčin zväčšenia okuláru objektívu).

Mechanický systém mikroskopu je určený na montáž častí optického systému.

Práca s mikroskopom

1. Umiestnite mikroskop oproti ľavému ramenu, čím pred sebou vytvoríte miesto pre album. Umiestnite šošovku do pracovnej polohy. Správnu inštaláciu šošovky je potrebné posúdiť podľa cvaknutia, ktoré je cítiť pri otáčaní revolvera. Vzdialenosť medzi šošovkou a sklíčkom by mala byť asi 1 cm Práca s mikroskopom začína vždy s malým zväčšením.

2. Úplne otvorte clonu. Zdvihnite kondenzátor na úroveň stolíka. Nasmerujte svetlo pomocou konkávneho zrkadla tak, aby bolo celé pole jasne a rovnomerne osvetlené.

3. Pripravené mikrosklíčko položte na stolík tak, aby sa jedna z častí nachádzala presne pod šošovkou. Na upevnenie mikrosklíčka stlačte sklíčko pomocou svorky.

4. Pomocou makroskrutky nastavte požadovanú ohniskovú vzdialenosť, aby ste získali jasný obraz v mikroskope. Nastavte vzdialenosť pomocou mikroskrutky.

5. Pred otočením mikroskopu na väčšie zväčšenie vyberte požadované miesto rezu, umiestnite ho do stredu zorného poľa a až potom vymeňte šošovky opatrným otáčaním revolvera.

6. Po ukončení práce je potrebné prepnúť mikroskop na malé zväčšenie a vybrať mikrovzorku.

7. Po použití by mal byť mikroskop zakrytý uzáverom, aby bol chránený pred prachom.

Metodika prípravy dočasných mikrosklíčok

1. Predmet treba vziať do ľavej ruky a držať ho tromi prstami, v pravej ruke holiaci strojček alebo čepeľ.

2. Vyrovnajte povrch predmetu tak, aby rovina rezu bola kolmá na os orgánu. Rezy sa robia pohybom žiletky smerom k vám.

3. Pipetou naneste 2-3 kvapky vody do stredu podložného sklíčka a najtenšie časti preneste na hrot pitevnej ihly, predmet prikryte krycím sklíčkom. Tekutina by nemala vytekať spod krycieho sklíčka.

4. Pripravený prípravok položte na stolík a skúmajte ho pri malom a veľkom zväčšení.

5. Okrem dočasných príprav sa na štúdium predmetov používajú trvalé prípravky. Inklúzna kvapalina v nich je glycerín so želatínou alebo kanadským balzamom.

6. Pri farbení preparátu treba brať do úvahy, že vplyvom koncentrovaných kyselín môže dôjsť k zuhoľnateniu organických inklúzií v bunke, minerálne inklúzie (kryštály, drúzy, cystolity) môžu úplne zaniknúť alebo zmeniť svoj tvar.

7. Liek nemôžete vybrať spod šošovky x40, pretože... jeho pracovná vzdialenosť je 0,6 mm a predná šošovka sa môže ľahko poškodiť.

Bunka

Bunka je základnou stavebnou a funkčnou jednotkou všetkého živého. Bunky prvýkrát opísal Robert Hooke v polovici sedemnásteho storočia (1665), keď skúmal kus korku. Znalosti o bunke sa rozšírili s vylepšením mikroskopu. Do polovice devätnásteho storočia sa nazhromaždilo dostatok poznatkov o bunke - objav jadra, plastidov, bunkového delenia atď. Všetky poznatky o bunke zovšeobecnil na prelome 30.-40.rokov 19.stor. botanik M. Schleiden a zoológ T. Schwann vo forme bunkovej teórie.

Hlavné tézy (postuláty) bunkovej teórie:

1. bunka - stavebná a funkčná jednotka všetkého živého;

2. mnohobunkový organizmus je komplexne organizovaný, integrovaný systém pozostávajúci z fungujúcich a interagujúcich buniek;

3. všetky bunky majú homológnu štruktúru;

4. „bunka z bunky.“ Princíp bunkovej kontinuity delením založil v roku 1958 nemecký vedec R. Virchow.

Tvar, štruktúra a veľkosť buniek sú veľmi rôznorodé. Rastlinná bunka pozostáva z protoplast, membrána alebo bunková stena a vakuola.

Protoplast zahŕňa: cytoplazma, jadro, plastidy, mitochondrie.

Cytoplazma- časť protoplastu uzavretá medzi plazmalemou a jadrom. Základom cytoplazmy je jej matrica, príp hyaloplazma- zložitý, bezfarebný koloidný systém. Najdôležitejšou úlohou hyaloplazmy je zjednotiť všetky bunkové štruktúry do jedného systému, čím sa zabezpečí interakcia medzi nimi v procesoch bunkového metabolizmu. Cytoplazma vykonáva väčšinu procesov bunkového metabolizmu, s výnimkou syntézy nukleových kyselín.

Jadro- povinná a hlavná súčasť živej bunky všetkých eukaryotov. Funkcie jadra: ukladanie a reprodukcia dedičných informácií, riadenie metabolizmu a takmer všetkých procesov prebiehajúcich v bunke, syntéza nukleových kyselín, syntéza bielkovín. Jadro je obklopené plášťom pozostávajúcim z dvoch membrán nesúcich veľmi veľké póry. Vnútorný obsah jadra sa nazýva jadrová šťava alebo nukleoplazma. Jedno alebo viac jadier je ponorených do jadrovej šťavy.

Mitochondrie bunkové organely, ktorých tvar, veľkosť a počet sa neustále mení. Hlavnou funkciou je zabezpečenie energetických potrieb bunky prostredníctvom oxidácie energeticky bohatých látok (cukrov) a syntézou ATP a ADP. Mitochondrie sú obklopené dvoma membránami, vnútorná tvorí výrastky - cristae. Mitochondrie, podobne ako plastidy, sú poloautonómne organely, pretože obsahujú DNA a ribozómy v matrici.

Plastidy charakteristické len pre rastliny. Existujú tri typy plastidov: chloroplasty, chromoplasty a leukoplasty. Hlavnou funkciou chloroplastov je fotosyntéza, leukoplasty sú zásobárňou živín a chromoplasty sú farbou kvetov a plodov. Chloroplasty pozostávajú z dvojitej membrány, matrice, tylakoidov spojených v grane, DNA, ribozómoch a primárnych škrobových zrnách.

Golgiho komplex- sústava diskovitých vačkov a vezikúl obklopených membránami. Vykonáva funkcie syntézy, akumulácie a uvoľňovania určitých polysacharidov (pektíny, hlien atď.), Sekundárne metabolity; tvorba vakuol a lyzozómov; distribúcia a intracelulárny transport určitých proteínov; podieľa sa na stavbe cytoplazmatickej membrány.

ER (endoplazmatické retikulum) - systém submikroskopických kanálikov ohraničených membránami. EPS sa delí na hladké a hrubé. Funkcie hrubého ER: syntéza proteínov; riadený transport makromolekúl a iónov; tvorba membrány; interakcia organel. Funkciou hladkého ER je syntéza lipofilných zlúčenín.

Vákuola- dutina v bunke obklopená membránou (tonoplast) a vyplnená bunkovou šťavou. Bunková šťava je vodný roztok rôznych látok - odpadových produktov protoplastu. Funkcie vakuol: akumulácia rezervných látok a odpadov; udržiavanie bunkového turgoru; regulácia rovnováhy voda-soľ v bunke.

Bunková stena oddeľuje bunku od jej prostredia. Jeho základom sú molekuly celulózy, ktoré sú zoskupené do mikrofibríl a fibríl. Molekuly celulózy sú ponorené do matrice, ktorú tvoria polysacharidy s viac rozvetvenou štruktúrou – hemicelulózy a pektíny, ako aj voda. Bunková stena je veľmi pevná a zároveň elastická. Molekuly celulózy mu dodávajú pevnosť a pružnosť - matricu. Bunková stena plní tvarotvorné a mechanické funkcie, poskytuje ochranu protoplastu, odoláva vysokému osmotickému tlaku vakuoly a cez bunkovú stenu dochádza k transportu látok.

Mikroskop.

V tomto článku vám prezradím 3 spôsoby prípravy prípravkov pre mikroskop. Tieto metódy sú najjednoduchšie.

Na začiatku článku je takzvaný slovník, alebo skôr vysvetlenie, čo je to ten či onen predmet.

Výroba mikrosklíčok si vyžaduje špeciálne nástroje, farbivá, ako aj istú dávku presnosti a zručnosti. Veľmi dôležité je prísne dodržiavanie všetkých potrebných podmienok – inak môže byť mikrosklíčko nevhodné na výskum.

V predaji sú hotové sady liekov na výskum (čo je vhodné pre domácnosť a školu) - napr. 25 liekov, alebo 38 snímok od Leeuwenhoeka. Rovnako ako minerály a iné sady.

vysvetlenia

Fixný liek- v mikrobiológii sa často pripravujú fixné preparáty, takže by ste mali vedieť, čo to je. Tieto prípravky sa skúmajú pod mikroskopom vo farebnej forme. Slovo „fixácia“ znamená také spracovanie živého objektu (o ktorom budete uvažovať), ktoré umožňuje rýchlo prerušiť životné procesy v konkrétnom objekte (vysvetlím to jednoduchšie - zabiť), pri zachovaní jemnej štruktúry. . V dôsledku fixácie sú bunky pevne pripevnené k sklu a sú lepšie zafarbené. Fixácia je nevyhnutná pri práci s patogénnymi mikroorganizmami (pre účely vlastnej bezpečnosti).

Pozastavenie- zmes akýchkoľvek látok, kde je tuhá látka rozložená vo forme malých častíc v kvapalnej látke v neusadzovanom stave.

Biologická slučka- tenká kovová tyčinka s tenkým kovovým očkom na konci. Používa sa na zachytenie malého množstva konkrétnej suspenzie mikroorganizmov.

Petrolatum- kvapalina podobná masti, bez zápachu a chuti. Zmes sa skladá z minerálneho oleja a parafínového vosku (voskovej zmesi).

Utesnenie- zabezpečenie dokonalej nepriepustnosti povrchov a spojov dielov pre rôzne plyny a kvapaliny.

Agar-agar- v mikrobiológii sa používa na výrobu pevných a polotekutých živných pôd, teda agarových pôd.

Carnoyova tekutina- kvapalina na fixáciu.

Horák- zariadenie s injektorom, ktorý je inštalovaný v kovovej rúrke s otvormi na vstup atmosférického vzduchu do tejto rúrky, ktorá je namontovaná na stojane s bočným vstupom na prívod plynu do rúrky, s otvormi vytvorenými na bočnom povrchu rúrky na ktorom sa zmení prívod vzduchu na horák, môže byť inštalovaná pohyblivá klapka, ktorá mení prietokovú plochu týchto otvorov.

Nikiforovova zmes- zmes rovnakých objemov etylalkoholu a bezvodého éteru síry, používaná na fixáciu krvných náterov, náterov orgánov a akýchkoľvek tkanív.

Príprava prípravku „rozdrvená kvapka“.

Príprava prípravku závesnej kvapky

Závesná kvapka.

Pomocou biologickej slučky opatrne naneste jednu kvapku suspenzie mikroorganizmov (vopred pripravenú) na čisté krycie sklíčko.
Prevráťte krycie sklíčko obsahujúce kvapku suspenzie tak, aby kvapka voľne visela.
Umiestnite obrátené krycie sklíčko obsahujúce kvapku na jamku špeciálneho krycieho sklíčka s priehlbinou v strede.
Kvapka by sa nemala dotýkať okrajov skla a priehlbiny (studne), mala by voľne visieť na krycom skle.
Okraje vybrania špeciálneho krycieho skla sú vopred namazané vazelínou na utesnenie komory.
Užite si pozorovanie baktérií na mikrosklíčkach!

Príprava prípravy „odtlačku“.

Z agarového média, na ktorom rastú prípadné mikroorganizmy v absolútnom súvislom trávniku alebo vo forme jednotlivých kolónií, opatrne vyrežte skalpelom nie príliš veľkú kocku.

Preneste ju na podložné sklíčko tak, aby povrch kocky s mikroorganizmami smeroval nahor.

Potom na trávnik od mikroorganizmov alebo na včelstvo opatrne a nie nasilu, ale zľahka priložte bežné krycie sklo (absolútne čisté), pritlačte ho biologickou slučkou alebo pinzetou a ihneď odstráňte, dávajte pozor, aby ste ho neposunuli nabok. .

Výsledný prípravok (krycie sklo s potlačou) sa vloží odtlačkom nadol do kvapky obyčajnej vody na čisté podložné sklíčko. Odtlačok možno získať aj na podložnom sklíčku dotykom povrchu kolónie podložným sklíčkom.

Droga je pripravená!
Pozor! Preparáty živých buniek sa skúmajú pomocou „suchých systémov“ mikroskopu. Po mikroskopii sa takéto prípravky musia pred umývaním uchovávať v dezinfekčnom roztoku (dezinfekčnom prostriedku).

Príprava prípravku „odtlačok“, iná metóda

Príprava prípravku "pevný náter".

Na prípravu tohto prípravku je potrebné naniesť jednu kvapku vody na podložné sklíčko bez tuku.

Vložte do nej materiál, ktorý testujete, pomocou biologickej slučky a rozdeľte ho tak, aby ste získali tenký a rovnomerný náter s priemerom približne 1-1,5 centimetra (iba pri takomto rozložení materiálu je možné vidieť izolované bakteriálne bunky v rozmazať).

Ak je testovaný materiál obsiahnutý v tekutom médiu, potom sa priamo nanesie na podložné sklíčko pomocou slučky a pripraví sa náter. Nátery sa sušia na vzduchu alebo v prúde teplého vzduchu nad plameňom horáka.

Na zafixovanie rozmazania sa veľmi opatrne 3-krát (iba na 3 sekundy) pretiahne podložné sklíčko (rozmazaním hore) cez plameň horáka. Mikroorganizmy v nátere pri fixácii odumrú, pevne sa prichytia k povrchu podložného skla a pri ďalšom spracovaní liečiva sa nevymývajú.

Pripravený!

Pozor! Dlhšie zahrievanie môže spôsobiť deformáciu bunkových štruktúr. Krvné nátery, nátery orgánov a akýchkoľvek tkanív a (v niektorých prípadoch nátery z kultúr) sa fixujú ponorením na 5-20 minút do metylovej modrej alebo etylalkoholu, Nikiforovovej zmesi, tiež sublimovaného alkoholu alebo iných fixačných tekutín.

Príklady mikrosklíčok pre mikroskop

Botanika a zoológia:

Cibuľová šupka
Ražné zrno
Koreňový uzáver
Lipová ratolesť
Prašník
Vaječník
kamélie
Epidermis listu pelargónie
Včelí končatina
Včelie krídlo
Cyclops
Volvox
Euglena
Ciliate papuče
Dážďovka (prierez)
Ústa komára
Ascaris
dafnie

Biológia a fyziológia:

Mutácia Drosophila (bezkrídla forma)
Mutácia Drosophila (čierne telo)
Drosophila "norma"
živočíšna bunka
rastlinná bunka
Mucor pleseň
Drvenie vajíčka
Mitóza v koreni cibule
Pruhované svaly
Spermie cicavcov
Nerv (prierez)
Uvoľnené spojivové tkanivo
Cicavčie vajíčko
Nervové bunky
Hyalínová chrupavka
Hladký sval
Kosť
Žabia krv
Ľudská krv
Jednovrstvový epitel

Nie všetko, čo je po ruke, má zmysel postaviť na pódium a skúšať skúmať cez okulár mikroskopu. Napríklad nebude vidieť nepriehľadné predmety (prst, minca) a na prezeranie stačí aj silná lupa.

Na mikroskopiu sa zvyčajne používajú špeciálne pripravené mikropreparáty. Pri príprave mikrosklíčka sa odoberá podložné sklíčko (veľkosť 25 × 75 mm), na ktoré sa položí predmetný predmet; Zvyčajne sa pre lepšiu konzerváciu a jednoduchosť použitia predmet na vrchu prekryje tenkým krycím sklom (rozmer 18 × 18 mm).

Podľa spôsobu prípravy a doby skladovania sa delia na:

trvalé lieky– predmet sa vloží do priehľadného vytvrdzovacieho média (zvyčajne kanadského balzamu) a prikryje sa krycím sklíčkom; takéto prípravky je možné skladovať roky a desaťročia, ale ich príprava je veľmi náročná na prácu (predmet treba starostlivo pripraviť: dehydrovať, natrieť atď.);
dočasné lieky– predmet sa vloží do tekutého média (voda, fyziologický roztok, glycerín-želatína atď.), takéto prípravky sú vhodné na použitie na niekoľko hodín, ale možno s nimi robiť experimenty (napríklad nahradiť vodu fyziologickým roztokom roztok určitej koncentrácie, pridanie farbiva a pod.).

Trvalý liek

V tabuľke sú uvedené typy liekov v závislosti od povahy skúmaného objektu.

	Popis	Trvalé/dočasné	Príklad
Celková droga	Celý organizmus alebo jeho malé časti (končatiny, ústne ústroje). Zvyčajne vyžadujú spracovanie (zosvetlenie)	Trvalé, dočasné
	Predmet sa zaleje do plastovej hmoty (parafín, akryl) a po vytvrdnutí sa pomocou mikrotómu (prístroj na získavanie tenkých rezov) rozreže na tenké platne.	Zvyčajne trvalé
	Prípravok na rezy prúdom bez krycieho skla (zvyčajne krvný prípravok): kvapka lešteného skla sa v tenkej vrstve nanesie na povrch podložného sklíčka a vysuší sa	Dočasné, menej často trvalé
	Tenká (0,03-0,02 mm hrubá) doska horniny alebo iného tvrdého exempláru (kosť, fosília) prilepená na krycie sklo	Neustále

V niektorých prípadoch je možné dočasný prípravok vidieť priamo bez prekrytia krycím sklíčkom. Vidieť takýto prípravok ostro naraz bude takmer nemožné – niektorá jeho časť bude zaostrená, ale zvyšok nie. Ale ak preskúmate takýto prípravok mikroskopom s malým zväčšením, môžete vidieť niekoľko zaujímavých objektov.

Vo forme otvorených dočasných prípravkov môžete pestovať kryštály rôznych solí (kyselina acetylsalicylová alebo aspirín; síran meďnatý alebo síran meďnatý; červená krvná soľ alebo hexakyanoželezitan draselný). Na vopred očistený povrch od prachu a odtlačkov prstov sa nanesie niekoľko kvapiek vodného alebo alkoholového soľného roztoku (pre lepšiu kvalitu kryštálov je lepšie roztok najprv prefiltrovať, pretože sa tým zníži počet kryštalizačných bodov a získajú sa väčšie a presnejšie kryštály). Kvapky sa nechajú zaschnúť (s jedným pohárom môžete experimentovať tak, že ho zahrejete, aby ste urýchlili odparovanie, a u druhého nechajte odpariť rozpúšťadlo a nechajte kryštály vypadnúť samé). Polohotovú mikrovzorku môžete skúmať aj v štádiu kryštalizačného procesu: môžete vidieť, ako kryštál rastie priamo pred vašimi očami alebo ako okolo embrya tuhej látky preteká kvapalina v dôsledku rozdielov v koncentráciách iónov.

Jednoduchá a efektívna metóda na výrobu mikropreparácií bez rezov, ktorá vám umožní preskúmať povrchový reliéf študovaného objektu (napríklad list rastliny, kožná vrstva tela hmyzu) - metóda repliky. Zahŕňa to zobrať predmet (napríklad list rastliny) a naniesť naň tenkú vrstvu číreho laku na nechty (stačí malá škvrna 5 x 10 mm). Po zaschnutí laku (asi po 5-7 minútach) sa na škvrnu laku prilepí kúsok lepiacej pásky; Takto sa replika oddelí, potom sa umiestni na podložné sklíčko a skúma sa pod mikroskopom.

1.1. Príprava dočasnej prípravy

Technika prípravy provizórneho prípravku je dobre známa zo školských pokusov s cibuľovými šupkami. Položte sklíčko na stôl (sklíčka sa vždy držia za bočné okraje sklíčka). Do stredu pohára dáme 1-2 kvapky vody a predmet skúmania, krycie sklíčko vezmeme za bočné okraje a kvapku opatrne prikryjeme predmetom na vrchu. Správnejšie je oprieť krycie sklo jednou z tvárí o predmet a pomaly zmenšovať uhol medzi sklami tak, aby sa kvapka zakryla predmetom. Tým sa znižuje možnosť vzniku vzduchových bublín.

1.2. Príprava krvného náteru

Krvné nátery na krvné testy sa pripravujú nasledovne.

Krok	Popis	Fotografia
	Umiestnite malú kvapku krvi na podložné sklíčko ležiace na vodorovnom povrchu pomocou sklenenej kapilárnej pipety (alebo priamo z miesta vpichu do prsta preneste vyčnievajúcu kvapku krvi na koniec sterilného podložného sklíčka, pričom dávajte pozor, aby ste sa nedotkli sklo s prepichnutou oblasťou kože).
	Čisté brúsené sklo sa umiestni s krátkym okrajom pod uhlom 45° k sklíčku na okraji kvapky. Počkáme, kým sa krv rozleje pod okraj pohára.
	Hneď ako sa krv rozšíri cez rebro, rýchlo posuňte kvapku po sklíčku. Na sklo by ste nemali silno tlačiť, pretože to môže zničiť krvinky.
	Po príprave sa náter rýchlo vysuší na vzduchu, kým mokrý lesk nezmizne tak, že ho podržíte nad tienidlom alebo ním zamávate vo vzduchu. Dobre urobený náter je tenký, žltkastej farby a končí „panicle“. Nevhodné sú husté ružové a červenkasté ťahy, ktoré sú príliš hrubé a bunkové elementy budú ťažko rozoznateľné.

Obrázky a popis z microtome.info/documents/micropreparaty.html.

2. Niektoré vlastnosti mikroskopie

Používanie mikroskopov pri malom a veľkom zväčšení je celkom dobre známe zo školských pokusov a nevyžaduje zvlášť zložité zručnosti.

2.1. Ponorná šošovka

Ak máte mikroskop s imerzným objektívom (je označený 100× MI a čierny krúžok a má pohyblivú časť šošovky smerujúcu k mikroskopickému preparátu), potom máte možnosť skúmať objekty s veľkým zväčšením (je však má zmysel používať na to nátery).

Postup pri práci s olejovou imerznou šošovkou je nasledovný.

Odstráňte suchú šošovku z dráhy lúča (otočte bubon šošovky tak, aby žiadna šošovka nesmerovala k preparátu).
Na prípravok naneste jednu kvapku imerzného (cédrového) oleja; Šošovku tejto šošovky je vhodné tiež mierne namazať imerzným olejom.
Otáčaním bubna šošovky vložte ponornú šošovku do dráhy lúča (kým nezapadne na miesto).
Sklopte šošovku, kým sa nedotkne kvapky imerzného oleja, potom pri pozorovaní cez mikroskop upravte zaostrenie pomocou skrutiek pre hrubé a jemné zaostrovanie.

Pri práci s imerzným objektívom bude potrebné maximálne osvetlenie. Po dokončení štúdie by sa mala ponorná šošovka utrieť mäkkou optickou handričkou alebo handričkou cambric, mierne navlhčenou špeciálnou kvapalinou na čistenie optiky. Dôležité: žiadne iné typy šošoviek nie je možné utrieť!

Použitie iných olejových kvapalín namiesto cédrového oleja sa neodporúča, pretože ak sa index lomu použitej imerzie (napríklad vazelínový olej s indexom 1,48162) líši od indexu lomu cédrového oleja (index 1,515), pokles naproti tomu rozmazaný obraz a rozlíšenie.

2.2. Fotografie v šikmom osvetlení a tmavom poli

Pre objemové prípravky (celkové prípravky hmyzu, rias a pod.) je zaujímavé použiť osvetlenie, ktoré sa líši od bežného priesvitného osvetlenia. Na nastavenie osvetlenia v mikroskopoch sa používa kondenzátor - otočné zariadenie s otvormi rôznych priemerov a umiestnení. Pomocou špeciálnych možností kondenzora môžete zmeniť charakter osvetlenia prípravku a zdôrazniť objem predmetného objektu.

Tabuľka porovnáva prácu s rôznymi typmi osvetlenia.

Typ osvetlenia	Spôsob tvorby	Pohľad na zrenicu šošovky s odstráneným okulárom	Príklad
Normálny (priesvitný)	Svetlo prechádza zorným poľom rovnomerne.