Pánske

Syntéza kyseliny hyalurónovej. Štruktúra a funkcie hyaluronanu (kyselina hyalurónová, HA). Vstrekovanie kyseliny hyalurónovej

Prvú zmienku o neobvyklom vysokomolekulárnom polysacharide, ktorý bol izolovaný zo sklovca hovädzieho oka, urobili v roku 1934 nemeckí biochemici Karl Meyer a John Palmer. Navrhli pomenovať novú látku kyselinu hyalurónovú. Ale v roku 1918 Levene a Lopez - Suarez izolovali polysacharid pozostávajúci z glukozamínu, kyseliny glukurónovej a malého množstva síranových iónov zo sklovca a pupočníkovej krvi. Potom bol pomenovaný mukoitín - kyselina sírová, ale teraz sa zistilo, že ide o kyselinu hyalurónovú izolovanú s prímesou sulfátovaných glykozaminoglykánov.

V priebehu nasledujúcich 10 rokov K. Meyer a niekoľko ďalších vedcov izolovali kyselinu hyalurónovú z živočíšnych orgánov. V roku 1937 F. Kendall izoloval kyselinu hyalurónovú zo streptokokových kapsúl.

Prvá skúsenosť s používaním HA v medicíne sa datuje do roku 1943, keď ju sovietsky lekár Nikolai Fedorovič Gamaleya používal v zložitých obväzoch pre mrazivých vojakov Červenej armády vo vojenskej nemocnici. Extrakt z pupočnej šnúry, ktorý nazval „regeneračným faktorom“, schválilo ministerstvo zdravotníctva ZSSR ako prípravok „regenerátora“. Od roku 1947 maďarský vedec Andre Balasz skúmal viskozitu HA v závislosti od pH a iónovej sily roztoku, jeho štiepenie pod vplyvom ultrafialového žiarenia a tiež študoval, ako kyselina hyalurónová pôsobí na živé bunky.

V súčasnosti sa hyaluronan ako predmet výskumu nachádza v biochémii, molekulárnej biofyzike, bioorganickej a radiačnej chémii. Lekárske aspekty zahŕňajú štúdium úlohy kyseliny hyalurónovej pri oplodnení, embryogenéze, vývoji imunitnej reakcie, pri hojení rán, rakovine a infekčných chorobách, procesoch starnutia a pri riešení problémov estetickej medicíny. Široká škála praktických aplikácií kyseliny hyalurónovej podporuje regeneráciu epitelu, zabraňuje tvorbe granulačných tkanív, adhézii, jazvám, znižuje opuchy, znižuje svrbenie kože, normalizuje krvný obeh, podporuje zjazvenie trofických vredov a chráni vnútorné tkanivá oka. Kyselina hyalurónová sa v aplikovanej biochémii a enzymológii používa pomerne dobre ako substrát na kvantitatívne stanovenie enzýmov s účinkom hyaluronidázy.

Čo je to vlastne kyselina hyalurónová? Je to dlhá nerozvetvená molekula, v ktorej sa striedajú zvyšky kyseliny D-glukurónovej a N-acetylglukozamínu. Bez toho, aby sme zachádzali do detailov, sme si všimli, že obe tieto látky sú modifikované molekuly glukózy. Molekula kyseliny hyalurónovej môže obsahovať viac ako 30 000 zvyškov každej z týchto látok. Okrem toho je tento reťazec v tele vždy spojený s určitým množstvom proteínu. Je zaujímavé, že takáto štruktúra je univerzálna a nachádza sa u rôznych predstaviteľov živočíšneho sveta a dokonca aj u niektorých baktérií. Kyselina hyalurónová patrí do triedy glykozaminoglykánov.

Obrázok 1. Štruktúra kyseliny hyalurónovej

Predtým sa metódy používali na získavanie kyseliny hyalurónovej zo sklovca oka kravy a hrebenatky kohúta. Nevýhody týchto spôsobov výroby boli ich vysoké náklady a prítomnosť proteínových nečistôt v konečnom produkte, čo viedlo k veľkému počtu alergických reakcií na liečivo.

Moderná produkcia HA je založená na fermentačnom procese s použitím baktérií (Streptococcus equi a Streptococcus zooepidemicus). Takto získaný HA má vyšší stupeň purifikácie, čo vysvetľuje lepšiu toleranciu HA voči pacientom. Biotechnológia na výrobu hyaluronanu z bakteriálnych kmeňov výrobcov zahŕňa ich kultiváciu za zvolených podmienok, pri ktorých sa vytvára kapsula polysacharidu na povrchu bakteriálnych buniek v štádiu logaritmického rastu a v stacionárnom štádiu rastu HA sa môže sekretovať do kultivačnej tekutiny, kapsula sa stáva tenšia alebo úplne zmizne.

HA je citlivá na kyslú hydrolýzu. Aj mierne okyslenie roztoku HA kyselinou octovou vedie k nezvratnému poklesu viskozity 2,5-krát. Pri minerálnych kyselinách je HA úplne hydrolyzovaná na kyselinu glukurónovú, glukozamín, kyselinu octovú a oxid uhličitý. Zriedená kyselina sírová hydrolyzuje kyselinu v krátkom čase za vzniku kryštálov disacharidov.

Redoxná depolymerizácia hyaluronanu . Deštrukcia makromolekuly polysacharidov pod vplyvom redoxných médií prebieha podľa mechanizmu voľných radikálov. Voľné radikály sa tvoria za účasti kyseliny askorbovej, hyaluronanu a kyslíka. Je dokázané, že kyselina hyalurónová sa depolymerizuje pôsobením iónov železa v prítomnosti kyseliny askorbovej. Preto HA uvoľňovaná v atmosfére dusíka alebo argónu má vyšší stupeň polymerizácie ako polymerizácia uvoľňovaná na vzduchu.

Na lekárske použitie je nevyhnutná sterilizácia roztokov hyaluronanu. Vykonáva sa autoklávovaním pri teplote 120 - 130 ° C alebo pomocou ionizujúceho gama žiarenia. V obidvoch prípadoch dochádza k významnej depolymerizácii biopolyméru a k strate jeho počiatočnej terapeutickej aktivity. Známe spôsoby ochrany roztokov hyaluronanu pred depolymerizáciou, založené na pridávaní rôznych aminokyselín, kyseliny boritej a glycerolu, hydrochinolínsulfátu, kyseliny močovej, fenolových zlúčenín (pyrogallolu) do roztokov.

Charakteristické vlastnosti kyseliny hyalurónovej - jej výrazná biologická aktivita, vynikajúca biologická kompatibilita, absencia antigenicity, dráždivé a iné vedľajšie účinky - priťahovali pozornosť vedcov. Vďaka svojim jedinečným fyzikálno-chemickým vlastnostiam našla HA uplatnenie v rôznych oblastiach medicíny, kozmetológie a veterinárnej medicíny. Skutočnosť, že HA je súčasťou mnohých tkanív (kože, chrupavky, sklovca) a je špecifická pre jednotlivé orgány a druhy, určuje jej použitie pri liečbe chorôb spojených s týmito tkanivami.

Biologické funkcie kyseliny hyalurónovej sa dajú rozdeliť na „pasívne“ a „aktívne“. Ako inertný materiál sa HA podieľa na homeostáze tkanív, pri stérickej regulácii (osmóza) prenikania akýchkoľvek látok, pôsobí ako „lubrikant“, ktorý zlepšuje pohyblivosť kĺbov atď. „Aktívne“ funkcie HA sú špecifické väzby na proteíny v medzibunkovej matrici a na povrchu bunky. Táto interakcia hrá dôležitú úlohu pri tvorbe chrupavky, v procesoch bunkovej proliferácie, v morfogenéze a embryonálnom vývoji zvierat, ako aj v mechanizmoch zápalu a nástupu rakoviny.

Kyselina hyalurónová sa používa v onkológii ako terapeutické činidlo. Mechanizmy pôsobenia HA na nádorové bunky sú rôzne. Na molekulárnej úrovni spočíva mechanizmus v skutočnosti, že HA s vysokou molekulovou hmotnosťou, ktorá sa viaže na receptory na bunkovej membráne nádorových buniek, spomaľuje ich migráciu a tvorbu metastáz. Druhým mechanizmom účinku je to, že zavedenie HA s vysokou molekulovou hmotnosťou podporuje tvorbu kapsuly spojivového tkaniva okolo nádoru. Tretí mechanizmus je spojený s vlastnosťou frakcie s vysokou molekulovou hmotnosťou inhibovať vaskularizáciu nádoru (klíčenie krvných ciev do nádoru), a tým viesť k spomaleniu rastu nádoru a metastáz, a naopak, k indukcii nádoru s nízkou molekulovou hmotnosťou.

Kyselina hyalurónová sa veľmi dobre prejavuje pri hojení popálenín, vredov, jaziev a pooperačných zákrokov. Vedci zistili, že nemá dráždivý účinok, a dokonca naopak pôsobí protizápalovo, podporuje rýchlu regeneráciu tkanív. Bio-explantát (film) založený na oxidovanom HA v experimente ukázal zrýchlené hojenie stehov črevných anastomóz so zvýšeným rizikom.

HA sa používajú pri príprave farmaceutických kompozícií ako zahusťovadlá, lubrikanty, činidlá pre filmové povlaky odolné voči žalúdočnej šťave, najmä pri príprave kapsúl, gélov, koloidov a rôznych zariadení (napríklad kontaktné šošovky, predmety z gázy, atď.) , Mechanizmus akumulácie v štruktúrach spojivového tkaniva mnohých liekov a antibiotík je pravdepodobne založený na ich väzbe na tkanivové proteoglykány. To isté možno povedať o depozičných mechanizmoch rôznych patologických produktov v tkanivách, najmä v matrici spojivového tkaniva. Normálne sa v prvý deň hojenia rán u nich pozoruje zvýšenie koncentrácie HA, ktoré po naviazaní na fibrínovú sieť vytvára prechodnú matricu, ktorá stimuluje aktiváciu a migráciu granulocytov, makrofágov a fibroblastov a proliferáciu epitelových buniek. Okrem toho HA prostredníctvom zvýšenej fagocytózy prispieva k úplnejšiemu očisteniu rany od nekrotických prvkov. V dôsledku zvýšenej aktivity makrofágov sa zvyšuje tvorba trofického faktora, ktorý priťahuje fibroblasty a endoteliálne bunky do postihnutej oblasti.

Obsah hyaluronanu v ľudskej koži nie je konštantnou hodnotou. V derme sú nevýznamné sezónne výkyvy HA: v lete je hladina hyaluronanu mierne nižšia ako v zime. To je spojené so zvýšenou rýchlosťou degradácie HA pod vplyvom UV žiarenia. Najvýznamnejšie zníženie koncentrácie HA súvisiace s vekom. Od 60 rokov sa vyskytuje viacnásobné zníženie koncentrácie HA v derme. Injekcia intracelulárneho podávania natívneho HA sa preto javí ako úplne prirodzený spôsob zápalu jeho nedostatku. Táto injekčná metóda v estetickej medicíne sa nazýva biorevitalizácia.

Vo vedeckej literatúre nájdete rozsiahle informácie o chemickej štruktúre, makromolekulárnych vlastnostiach, biologických vlastnostiach a lekárskom použití kyseliny hyalurónovej.

HA je súčasťou hlavnej medzibunkovej látky spojivových, epitelových a nervových tkanív, je prítomná vo veľkých množstvách v sklovcom tele oka, synoviálnej tekutine kĺbov, kože, stenách tepien a žíl, srdcových chlopniach a v glomerulárnej bazálnej membráne obličiek.

Od objavenia kyseliny hyalurónovej došlo k významnému vývoju názorov. Ak sa spočiatku predpokladalo, že tento polysacharid slúži ako pasívna štrukturálna zložka medzibunkovej matrice, potom je už zahrnutý v mnohých biologických procesoch: od reprodukcie, migrácie, diferenciácie buniek počas embryogenézy až po reguláciu zápalu a hojenia rán, metastázy rakovinových buniek. V tele vykonáva HA viac fyziologických funkcií: slúži ako základ pre fungovanie systému tela, určuje priepustnosť tkanív a krvných ciev obehového systému a odolnosť voči infekcii. Ale s vekom sa všetky funkcie spomaľujú.

Takáto široká škála biologických vlastností kyseliny hyalurónovej je spôsobená funkciou molekulárnej hmoty, ktorá hrá významnú úlohu pri správaní buniek, polymorfizmom štruktúrnych foriem a fyzikálno-chemických vlastnostiach molekúl rôznych molekulových hmotností v závislosti od iónového prostredia a koncentrácie biopolyméru v tkanivách a orgánoch.

Stručne povedané, môžeme povedať, že kyselina hyalurónová našla svoje uplatnenie v mnohých odvetviach medicíny. Používa sa pri kozmetických injekciách (biorevitalizácia), je súčasťou rôznych kozmetických prípravkov. Je potrebné poznamenať, že HA môže mať pri častých injekciách pod kožu negatívne následky. Ak chcete udržiavať svoju pokožku v dobrej kondícii, musíte viesť zdravý životný štýl, správne jesť a nezneužívať zlé návyky. Oftalmológovia ho tiež používajú ako liečbu katarakty, syndrómu suchého oka. V imunológii sa používa na komplexné liečenie imunodeficiencie pri vírusových infekciách. Môže sa tiež použiť na liečbu žalúdočných vredov, dvanástnikových vredov pomocou aktivácie trypsínu.

Zoznam odkazov

Egorov E.A. Kyselina hyalurónová: použitie v oftalmológii a liečbe syndrómu suchého oka // rakovina prsníka. Klinická oftalmológia. - 2013. - Zväzok 13, č. 2. S. - 72.
Sigaeva N.N., Kolesov S.V., Nazarov P.V., Vildanova R.R. Chemická modifikácia kyseliny hyalurónovej a jej použitie v medicíne // Bulletin University of Bashkir. - 2012. - T.17. Číslo 3. S. - 1221 - 1222.
Strelnikova L.N., Kleshenko E.V., Astrin A.V. Chémia a život // Mesačný vedecký a populačný časopis. - 1. decembra 2010. Č. 12. S. - 22 - 23.
Khabarov V.N., Boykov P.Ya., Selyanin M.A. Kyselina hyalurónová: výroba, vlastnosti, použitie v biológii a medicíne. - M.: Practical Medicine, 2012. - 224 s .: Ill. S. - 9 - 11, 19 - 30, 218.

Kyselina hyalurónová (hyaluronát) je jednou z najdôležitejších zložiek štruktúr extracelulárneho tkaniva, látky, ktorá je súčasťou väčšiny biologických tekutín a vykonáva v ľudskom tele množstvo životne dôležitých funkcií. V tele mladého muža s hmotnosťou 70 kg je asi 15 g tejto zlúčeniny. Okrem toho viac ako tretina jej rezerv podlieha dennej transformácii (syntetizovanej alebo rozdelenej).

Bolo dokázané, že v priebehu času sa koncentrácia kyseliny hyalurónovej v tele znižuje. Napríklad v orgánoch a tkanivách osoby, ktorá dosiahla vek 50 rokov, je o 30 až 40% tejto zlúčeniny prítomných menej ako v tele 17-ročného tínedžera. Z tohto dôvodu moderní odborníci na výživu odporúčajú, aby každý, kto dosiahne vek 33 - 35 rokov, zvýšil tok tejto látky zvonka, tj s jedlom.

Hyaluronát bol prvýkrát izolovaný vedcami C. Meyerom a D. Palmerom zo sklovca kravského oka v roku 1934. Chemická štruktúra tejto zlúčeniny bola stanovená oveľa neskôr - v druhej polovici minulého storočia. Pokiaľ ide o biomedicínske vlastnosti kyseliny hyalurónovej, ich štúdia stále prebieha.

Biologické funkcie hyaluronátu

Kyselina hyalurónová je životne dôležitou látkou pre človeka, ktorý vykonáva širokú škálu biochemických funkcií. K dnešnému dňu sa preukázalo, že táto zlúčenina:

je podstatnou zložkou epitelových, spojivových a nervových tkanív, biologických tekutín;
zvyšuje intenzitu metabolizmu sodíka, draslíka a horčíka v bunkách;
udržuje optimálnu rovnováhu tekutín vo všetkých tkanivách ľudského tela;
zabraňuje predčasnému starnutiu;
urýchľuje proces regenerácie aktiváciou vylučovacej schopnosti fibroblastov (buniek, ktoré tvoria spojovacie tkanivo);
urýchľuje procesy fúzie kostného tkaniva pri zlomeninách a iných zraneniach;
poskytuje viskóznu konzistenciu synoviálnej tekutiny;
vytvára optimálne podmienky pre proliferáciu (delenie) a bunkovú migráciu;
zlepšuje mikrocirkuláciu krvi;
zvyšuje rýchlosť prenosu živín do tela;
chráni orgány a tkanivá pred zranením pri stlačení;
poskytuje ochranu pleti pred negatívnymi účinkami priameho slnečného žiarenia;
stimuluje procesy zodpovedné za syntézu elastínu a kolagénu;
má výrazný protizápalový účinok;
je to jedna zo súčastí, ktoré tvoria kĺbovú chrupavku, zabezpečuje ich normálnu funkciu;
eliminuje účinky vnútornej intoxikácie;
chráni telo pred mikróbmi (aktivuje baktericídne faktory na povrchu rany a na pokožke);
mení aktivitu lymfocytov, čím posilňuje ľudskú imunitu;
je antioxidant;
prispieva k odstraňovaniu štruktúr odumretých buniek a odpadových produktov z tela;
zabraňuje rozvoju mnohých očných chorôb, je štrukturálnym prvkom sklovca ľudského oka a je súčasťou ďalších prvkov vizuálneho aparátu, podporuje priechod svetelných lúčov do sietnice oka a zároveň zabraňuje deformácii;
zabraňuje vzniku porúch v kĺboch;
je modulátor kontúr tváre a tela;
má schopnosť udržať vlhkosť v pokožke, dodáva pokožke pružnosť, zvyšuje jej odolnosť proti nepriaznivým faktorom a zabraňuje vzniku vrások a prejavov vrások;
má priaznivý vplyv na fungovanie reprodukčného systému;
podieľa sa na procesoch vnútromaternicového vývoja a rastu plodu počas tehotenstva.

Je potrebné poznamenať, že táto zlúčenina hrá významnú úlohu v procese oplodnenia vajíčok. Normálne je oocyt, ktorý opúšťa vaječník počas ovulácie, pokrytý dvoma ochrannými membránami (zona pellucida a corona radiata) obsahujúcimi veľké množstvo hyaluronátu. Hnojenie je možné iba vtedy, ak nie je narušená integrita týchto škrupín. Po zničení ochranných vrstiev stráca vajíčko svoju schopnosť oplodniť spermie a zomrie. Inými slovami, nedostatočný príjem hyaluronátu v tele môže spôsobiť ženskú neplodnosť.

Aké potraviny obsahujú kyselinu hyalurónovú?

V mladosti je ľudské telo schopné syntetizovať kyselinu hyalurónovú a nezávisle uspokojiť svoju potrebu tejto látky. S vekom sa však produkcia tejto zlúčeniny znižuje a jej nedostatok začína mať negatívny vplyv na stav kože, kĺbov, na činnosť vnútorných orgánov a systémov. Jedným zo spôsobov, ako eliminovať nepríjemné príznaky sprevádzajúce nedostatok hyaluronátu, je zahrnúť do ponuky potraviny bohaté na túto látku alebo zlúčeniny, ktoré stimulujú jej výrobu.

Za hlavný potravinový zdroj kyseliny hyalurónovej sa považujú mäsové výrobky. Okrem toho je najväčšie množstvo tejto látky prítomné v tých druhoch mäsa (a jedál pripravených na ich základe), ktoré obsahujú dostatočný počet kĺbov, šliach, chrupaviek a kože. Napríklad môžete doplniť stratené zásoby hyaluronátu pravidelným zahrnutím do ponuky:

bohaté mäsové bujóny;
varené alebo dusené mäso na kosti;
želé vyrobené na báze moriek, bravčového mäsa, kuracieho alebo hovädzieho mäsa;
akékoľvek jedlá obsahujúce želatínu (želé, lekváre, marshmallows atď.).

Je potrebné poznamenať, že rastlinné potraviny sú tiež bohatým zdrojom kyseliny hyalurónovej. Najmä sa zistili zvýšené koncentrácie tejto látky v sójových bôboch, sójovom mlieku a zelenine, ktoré obsahujú veľké množstvá škrobu. Koncom 20. storočia sa na koži červených hrozien našli látky stimulujúce tvorbu hyaluronátu. Výsledkom bolo, že do množstva rastlinných výrobkov boli zahrnuté červené vína a prírodná hroznová šťava, aby sa doplnili rezervy tejto jedinečnej zmesi v ľudskom tele.

V niektorých liečivých bylinách sa nachádza významné množstvo kyseliny hyalurónovej. Za bohatý zdroj tejto látky sa považujú najmä listy a plody lopúcha, ktoré sa používajú na výrobu zdravých a chutných bylinkových čajov.

Aké faktory ovplyvňujú syntézu a absorpciu hyaluronátu v tele?

Existuje niekoľko faktorov, ktoré môžu mať pozitívne aj negatívne účinky na procesy výroby a absorpcie kyseliny hyalurónovej. Napríklad syntéza tejto zlúčeniny a jej stráviteľnosť sa významne zvýšia súčasným použitím produktov obohatených o kyselinu askorbovú a rutín. Z tohto dôvodu odborníci na výživu odporúčajú, aby ľudia trpiaci nedostatkom kyseliny hyalurónovej do svojej stravy pridávali čo najčastejšie tieto potraviny a jedlá:

zelený čaj;
citrusové plody (najlepšie zo všetkých - grapefruity, pomaranče a citróny);
horský popol;
niektoré bobule (černice, čierne ríbezle, maliny);
vlašské orechy;
marhule
čerešne;
greeny (petržlen, koriandr, kôpor);
všetky odrody kapusty;
listový šalát;
dogrose a infúzie pripravené na jeho základe;
paradajky

Súčasne existujú faktory, ktoré môžu významne spomaliť produkciu a absorpciu kyseliny hyalurónovej. Sú hlavnými dôvodmi rozvoja nedostatku tejto látky v tele.

Nedostatok kyseliny hyalurónovej a jej dôsledky

Hlavnými dôvodmi vzniku nedostatku kyseliny hyalurónovej v tele sú:

fajčenie;
zneužívanie alkoholických nápojov so zvýšenou silou, používanie červeného vína v dávkach presahujúcich prípustné (viac ako 140 ml počas dňa);
nedostatočný príjem vitamínu C, rutínu a iných prospešných látok;
príliš dlhý pobyt v soláriu pod vplyvom priameho slnečného žiarenia, odmietnutie použitia krémov na opaľovanie;
zníženie koncentrácie tejto látky v tkanivách ľudského tela súvisiace s vekom.

Nedostatok tejto zlúčeniny môže viesť k širokému spektru nepriaznivých účinkov. Medzi príznaky nedostatku hyaluronátu patria najmä:

zhoršenie celkového zdravotného stavu, únava, ľahostajnosť k súčasným udalostiam;
oslabenie imunitných síl tela, častý výskyt prechladnutí;
dehydratácia, ochabnutie, nadmerná suchosť pokožky;
zmena obrysov tváre a tela k horšiemu;
vývoj dermatologických chorôb;
poškodenie zraku a výskyt iných porúch pri prevádzke vizuálneho prístroja;
skorý výskyt vrások a iné znaky starnutia;
vývoj kĺbových ochorení a výskyt iných patologických stavov pri práci pohybového aparátu;
predĺžené hojenie rán, pomalá fúzia kostného tkaniva počas zlomenín;
výskyt príznakov intoxikácie;
neschopnosť otehotnieť dieťa na dlhú dobu;
výskyt porušení vo vývoji plodu, spomalenie jeho rastu.

Ak zistíte takéto príznaky, musíte skontrolovať svoju stravu a obohatiť ju o potraviny bohaté na kyselinu hyalurónovú a látky, ktoré aktivujú jej syntézu. Okrem toho je potrebné opustiť zlé návyky a chrániť sa v čo najväčšej možnej miere pred pôsobením faktorov, ktoré nepriaznivo ovplyvňujú vývoj tejto nevyhnutnej zmesi.

Kyselina hyalurónová (hyaloid \u003d sklovitá + urónová \u003d kyselina) - látka patriaca do skupiny polysacharidov syntetizovaná bunkami väčšiny živých organizmov, ktorá je dôležitou zložkou kože, svalov, nervov a iných ľudských tkanív.

V popisoch zloženia kozmetických výrobkov sa niekedy nazýva „hyalurón“, biochémovia často používajú výraz „hyaluronát sodný“, pretože v ľudskom tele je prítomný hlavne vo forme sodnej soli.

Biologická úloha

Kyselina hyalurónová je nevyhnutná na tvorbu medzibunkovej látky, ktorá je prostredím pre fungovanie buniek: ich delenie, príjem živín do nich a vylučovanie odpadových produktov.

Polovica všetkej kyseliny hyalurónovej v tele sa nachádza v pokožke. Tu ide o prirodzené výplň medzier medzi vláknitými prvkami kože - kolagén a elastín, ktorý sa podieľa na ich syntéze.

Kyselina hyalurónová sa tiež podieľa na procesoch hojenia rán, ovplyvňuje imunitné reakcie, blokuje účinok voľných radikálov na bunky a chráni tkanivá pred predčasným starnutím.

Jednou z najdôležitejších vlastností kyseliny hyalurónovej je jej najvyššia hydrofilnosť - schopnosť viazať vlhkosť. Jedna z jej molekúl je schopná pojať až 500 molekúl vody. Dokonca ani 1% vodný roztok kyseliny hyalurónovej už nie je tekutinou, ale viskóznym gélom.

Čo spôsobuje nedostatok kyseliny hyalurónovej?

S vekom, pod vplyvom environmentálnych faktorov a prírodných procesov starnutia, sa obsah kyseliny hyalurónovej v ľudskom tele znižuje, o 50 rokov sa jej množstvo znižuje na polovicu. Zníženie koncentrácie g.k. v pokožke vedie k dehydratácii, k zníženiu syntézy kolagénu a elastínu v nej, čo sa prejavuje vo forme sucha, ochabnutia, vrások.

Aplikácia v kozmetike

V modernej kozmetike sa kyselina hyalurónová používa ako hlavná zložka prípravkov na zvlhčenie pokožky. Účinnejšia látka na tento účel ešte nebola nájdená.

Pretože kyselina hyalurónová nie je pre telo cudzou látkou, prípravky na jej základe sú hypoalergénne.

Kyselina hyalurónová použitá v kozmetike môže byť prírodná alebo umelá. Pretože jeho metabolizmus je veľmi aktívny (molekula gk „žije“ v tele po dobu 2 až 3 dní, potom je zničená a nová je syntetizovaná bunkami) umelo syntetizované látky sa častejšie používajú na zavedenie do hlbších vrstiev kože, vyznačujúce sa tým, že molekuly g sú k. „Prešité“ spolu a na ich rozdelenie potrebuje telo viac času.

Kyselina hyalurónová v zložení výrobkov na vonkajšie použitie (krémy, emulzie, pleťové vody, atď.) Pôsobí ako zvlhčovač. Najtenší film na povrchu pokožky, ktorý vytvára, zabraňuje nadmernému odparovaniu vody, udržuje potrebnú vlhkosť. Zároveň nezanáša póry pokožky, neinterferuje s perkutánnou výmenou plynov a podporuje hlbšie prenikanie ďalších účinných látok, ktoré tvoria produkt. Pri aplikácii na povrch pokožky však kyselina hyalurónová neprenikne do svojich hlbokých vrstiev, poskytuje iba povrchovú krátkodobú hydratáciu.

Pre hlbokú a dlhodobú hydratáciu, pre stimuláciu fibroblastov sa používa zavedenie kyseliny hyalurónovej do hlbších vrstiev pokožky - metóda biorevitalization .

V roku 2005 sa používajú gélové prípravky s vysokou koncentráciou kyseliny hyalurónovej tvarovanie - na korekciu nasolabiálnych záhybov, vrások, zväčšenia pier.

V mezoterapeutických prípravkoch sa vlastnosť kyseliny hyalurónovej používa na zlepšenie prenikania ďalších látok, ktoré sa do nej dostávajú, do buniek.

Kyselina hyalurónová sa používa nielen v kozmetológii, je súčasťou liekov široko používaných v mnohých oblastiach medicíny - oftalmológia, kardiológia, transplantologia, chirurgia atď.

Koncom 80. rokov dvadsiateho storočia si lekári všimli, že proces hojenia rán v prenatálnom období prebieha trochu inak ako po narodení. Na liečenie vrodených vývojových abnormalít sa na plodoch vo vnútri tela tehotných žien (v 2. až 6. mesiaci tehotenstva) uskutočnili chirurgické operácie. Po pôrode sa na telách týchto detí nezistili žiadne stopy po operáciách. Vedci to pripisujú veľmi vysokej koncentrácii kyseliny hyalurónovej v tele plodu a plodovej vode, ktorá ju obklopuje.

1. História objavu

2. Fyzikálno-chemické vlastnosti HA

3. Biologická úloha HA

4. Syntéza a metabolizmus HA v ľudskom tele

5. Získanie a úprava HA

6. Aktívne biologické funkcie HA v ľudskom tele

7. Použitie HA v kozmetike a plastickej chirurgii

8. Vstrekovacie techniky na zavedenie kyseliny hyalurónovej a ich komplikácie

1. História objavu

Kyselina hyalurónová (hyaluronát, hyaluronan) (HA) - nesulfonovaný glykozaminoglykán, ktorý je súčasťou spojivového, epiteliálneho a nervového tkaniva. Je to jedna z hlavných zložiek extracelulárnej matrice, ktorá sa nachádza v mnohých biologických tekutinách (sklovitá, synoviálna tekutina atď.). Názov „kyselina hyalurónová“ dostal táto látka v roku 1934 K. Meyer. Chemická štruktúra kyseliny hyalurónovej (bola založená v 50. rokoch 20. storočia K. Meyerom a J. Palmerom, ktorí ju prvýkrát identifikovali zo sklovca oka).

2. Fyzikálno-chemické vlastnosti HA

Kyselina hyalurónová je polymér pozostávajúci zo zvyškov kyseliny D-glukurónovej a D-N-acetylglukozamínu, ktoré sú striedavo spojené p-1,4- a P-1,3-glykozidovými väzbami. Molekula HA môže obsahovať až 25 000 takýchto disacharidových jednotiek. Prírodný HA má molekulovú hmotnosť 5 až 20 000 kDa a je tiež produkovaný niektorými baktériami (napr. Streptococcus) [Murray R. et al., 2009], ale neexistuje vo voľnom stave, iba vo forme solí Na, Ca, atď., preto, keď hovoríme o HA, akákoľvek soľ sa vždy predpokladá.

3. Biologická úloha HA

Dokonca aj 1% roztok HA má viditeľnú viskozitu, pretože jeho molekuly tvoria niečo ako sieť vo vode. Niet divu, že kyselina hyalurónová sa niekedy nazýva molekulárna špongia [Senore Jean-Marc, 1998]. Vďaka svojim fyzikálno-chemickým vlastnostiam (vysoká viskozita, špecifická schopnosť viazať vodu a proteíny a tvoriť proteoglykánové agregáty) HA podporuje prejav mnohých funkcií spojivového tkaniva a je jednou z hlavných zložiek extracelulárnej matrice, sklovca tela oka a synoviálnej tekutiny. [Stroitelev V., Fedorishchev I., 2000].

Štúdie HA ukázali, že jedinečnosť tejto látky spočíva aj v skutočnosti, že molekuly HA s rôznymi dĺžkami reťazca polysacharidov majú rôzne účinky na správanie buniek:

— Krátky reťazec gk (s molekulovou hmotnosťou menej ako 30 000) majú protizápalové účinky;

— Stredná molekulová hmotnosť (s molekulovou hmotnosťou viac ako 500 000) inhibuje angiogenézu, inhibuje bunkovú migráciu a proliferáciu, ako aj produkciu interleukínu-1b a prostaglandínu E2, v dôsledku čoho sa vo veľkej miere používa v oftalmológii a liečbe posttraumatickej a degeneratívnej artritídy;

— Frakcia HA s vysokou molekulovou hmotnosťou s mólom. s hmotnosťou 50 000 - 100 000 má schopnosť stimulovať migráciu a množenie buniek v koži a má tiež veľkú schopnosť zadržiavať vodu. Jedna molekula vysokomolekulárnej frakcie HA sa viaže až na 500 molekúl vody. Preto je derma obsahujúca značné množstvo HA optimálne nasýtená vodou, ktorá dodáva pokožke elasticitu a odolnosť voči vonkajším vplyvom.

4. Syntéza a metabolizmus HA v ľudskom tele

Na rozdiel od iných glykozaminoglykánov syntetizovaných v Golgiho prístroji sa HA syntetizuje na vnútornom povrchu plazmatickej membrány. Ako sa predlžuje polymérny reťazec, HA sa vypúšťa cez membránu na svoj vonkajší povrch. Mimo bunky môže HA tvoriť komplexy s proteínmi viažucimi sa na hyaluronát nazývanými hyalateríny.

Všetky hyaladheríny obsahujú motív viažuci hyaluronát alebo proteoglykánovú tandemovú repetíciu (PTR) vo forme jednej (CD44 a TSG-6) alebo dvoch kópií (Wernickan, väzobný proteín, agrekan, neurokan, brevikan). Rôzne tkanivá obsahujú rôzne sady hyaladherínov, čo je spôsobené štruktúrnymi vlastnosťami a funkciami konkrétneho spojivového tkaniva. Agregan a väzobný proteín sa teda našli v chrupavke, zatiaľ čo verzikan sa našiel v mäkšom spojivovom tkanive dermis.

Syntéza hyaluronátu sa uskutočňuje enzýmom hyaluronát syntáza. U ľudí existujú tri hyaluronát syntázy HAS1, HAS2 a HAS3. Sú kódované rôznymi génmi, ktoré sú lokalizované na rôznych chromozómoch a pochádzajú od spoločného predka. Každý zo syntetizovaných proteínov HAS (hyaluronát syntázy) môže hrať špecifickú úlohu v biosyntéze hyaluronátu:

— Proteín HAS1 uskutočňuje pomalú syntézu hyaluronátu s vysokou molekulovou hmotnosťou;

— Proteín HAS2 významne aktívnejší ako HAS1 a tiež syntetizuje hyaluronát s vysokou molekulovou hmotnosťou (do 2 x 106 Da);

— Proteín HAS3 najaktívnejší z troch proteínov HAS, ale syntetizuje kratšie reťazce hyaluronátu ((2-3) x 105 Da).

Molekuly hyaluronátu rôznej dĺžky ovplyvňujú správanie buniek rôznymi spôsobmi. Možno to hrá dôležitú úlohu v mechanizmoch fyziologickej regulácie.

HA sa degraduje pod vplyvom skupiny tkanivových enzýmov nazývaných hyaluronidázy. Produkty rozkladu HA (oligosacharidy a hyaluronáty s nízkou molekulovou hmotnosťou) vykazujú proangiogénne vlastnosti (stimulujú tvorbu nových kapilár z existujúcich ciev. Nedávne štúdie navyše ukázali, že fragmenty HA môžu na rozdiel od natívneho vysokomolekulárneho polysacharidu indukovať zápalovú odpoveď v makrofágoch a v prípade poškodenia tkaniva a odmietnutia transplantovanej kože. Ľudské telo s hmotnosťou 70 kg obsahuje v priemere asi 15 gramov HA, z ktorých tretina sa každý deň premieňa (štiepi alebo syntetizuje).

5. Získanie a úprava HA

Na praktické účely v medicíne a kozmetológii sa HA vyznačuje rôznymi biologickými tkanivami - sklovcom tele zvierat, synoviálnej tekutine, pupočnej šnúre, membránach rôznych kmeňov mikroorganizmov atď. Hlavným a najsľubnejším zdrojom získania HA sú vtáčie hrebene.

Nemenej dôležitou úlohou je čistenie HA extraktov z cudzích proteínových frakcií a nukleových kyselín a následné prepožičiavanie požadovaných vlastností prípravku pomocou jeho modifikácie, poskytovaním jeho reologických a viskoelastických vlastností, ako aj zvyšovania odolnosti proti degradácii vplyvom telesných enzýmov a vonkajších faktorov. Takáto zmena vlastností HA rozširuje rozsah aplikácie ako súčasť rôznych liekov a liečivých látok.

Je poskytnutá jedna metóda modifikácie fotopolymerovací alebo foto-zosieťovanie molekúl kyseliny hyalurónovej pod vplyvom kvantového / laserového žiarenia určitých vlnových dĺžok od 514 do 790 nm.

6. Biologické funkcie HA v ľudskom tele

regeneráciu: Zvýšená migrácia a schopnosť vylučovania fibroblastov

protizápalové: Zlepšenie mikrocirkulácie krvi

antimikrobiálne: Aktivácia baktericídnych faktorov na povrchu pokožky a na povrchu rany

Antitoxická: Znížená endogénna intoxikácia

imunomodulačnej: Posilnenie fagocytózy, zmeny v aktivite lymfocytov

antioxidant: Prijatie reaktívnych druhov kyslíka blokovaním oxidácie voľných radikálov lipidov

hemostatický: Aktivácia hemostázových komponentov s tvorbou trombu

Vďaka svojim jedinečným vlastnostiam sa HA ako monoterapia alebo ako kombinovaná synergia s quantoforézou a ďalšími fyzioterapeutickými faktormi (elektroforéza, ionoforéza, magnetoterapia atď.) Široko používa v liečebných a rehabilitačných programoch v rôznych oblastiach lekárskej praxe a kozmetológie: ortopédia, traumatológia, šport medicína, chirurgia, gynekológia, neurológia, urológia, dermatológia, estetická medicína atď.

7. Použitie HA v kozmetike a plastickej chirurgii

Prítomnosť kyseliny hyalurónovej v koži prvýkrát preukázal K. Meyer v roku 1948. Doteraz sa zistilo, že koža (epidermis a dermis) patrí medzi tkanivá s najvyšším obsahom hyaluronátu, ktorý do značnej miery určuje nielen štruktúru, ale aj ochranné a regeneračné vlastnosti pokožky.

Kyselina hyalurónová - prírodný zvlhčovač a kostra pokožky.

V derme vytvára HA štruktúru, ku ktorej sa viažu iné glykozaminoglykány (a predovšetkým chondroitín sulfát) a proteíny, ktoré sa nazývajú selektívne viažu na HA hyalaterínmi, s vytvorením polymérnej siete, ktorá vypĺňa väčšinu extracelulárneho priestoru, čím poskytuje mechanickú podporu tkanivám, rýchlu difúziu vo vode rozpustných molekuly a bunková migrácia. Na druhej strane, v epiderme je HA lokalizovaná v pericelulárnom priestore, čím sa vytvára bunková membrána, ktorá ho chráni pred pôsobením toxických látok.

Je potrebné poznamenať, že iba frakcia HA s molekulovou hmotnosťou 50 000 až 100 000 má schopnosť stimulovať migráciu a množenie buniek v koži a má tiež najvyššiu možnú úroveň zadržiavania vody. Jedna molekula vysokomolekulárnej frakcie HA sa viaže až na 500 molekúl vody. Preto je pokožka obsahujúca značné množstvo HA nasýtená vodou čo najviac, čo jej dodáva elasticitu a odolnosť voči vonkajším vplyvom.

Jedným z hlavných príznakov starnutia pokožky je pokles HA a úzko súvisiace zníženie vlhkosti v pokožke. Najväčšie množstvo kyseliny hyalurónovej sa nachádza v spojivovom tkanive novorodencov. Až do veku 30 - 35 rokov zostáva množstvo HA v derme pomerne stabilné, po ktorom začne pomerne rýchlo klesať, čo je signalizované príznakmi biologického starnutia, ktoré sa v tom čase objavujú - strata vlhkosti, zhoršenie pružnosti a tonusu pokožky a vrásky.

Okrem toho sa s vekom vnútorná syntéza kyseliny hyalurónovej v derme a epiderme znižuje a jej deštrukcia pod vplyvom rôznych vonkajších a vnútorných faktorov sa zrýchľuje [Senore Jean-Marc, 1998].

HA je vďaka svojim jedinečným vlastnostiam široko využívaná v rôznych oblastiach lekárskej praxe a kozmetológie.

V súčasnosti sú veľmi populárne postupy zamerané na omladenie pokožky tváre, rúk a iných exponovaných častí tela a odstránenie viditeľných znakov starnutia pri intrakutánnom podaní HA, ktoré sa nazýva hyalurónová biorevitalizácia (hyaluroplastika), to znamená obnovenie množstva HA v charakteristike pokožky v mladom veku.

8. Vstrekovacie techniky na zavedenie kyseliny hyalurónovej a ich komplikácie.

Tradičnými formami takého doplňovania je metóda vstrekovania kyseliny hyalurónovej do pokožky, ktorá má množstvo nedostatkov a komplikácií, ktoré závisia od mnohých vonkajších a vnútorných faktorov, vrátane tých, ktoré sú spojené s personálnymi chybami, individuálnymi charakteristikami a zvýšenou citlivosťou kože na alergénnu povahu lieku vstupujúceho do krvného riečišťa, ako aj prítomnosť sprievodných chorôb a kontraindikácií.

Medzi najčastejšie komplikácie injekčného HA patrí:

- objavenie sa opuchu, závažných granulomatóznych reakcií, rôzneho stupňa edému a erytému v mieste vpichu v dôsledku lokálnych reakcií z precitlivenosti, ako je angioedém, ktoré môžu pretrvávať dlho a mať negatívne estetické následky;

- po injekcii HA sa recidíva herpetických erupcií často vyskytuje v dôsledku stimulácie latentného herpes vírusu, najmä do pier;

- použitie infikovaného alebo zle očisteného lieku vyvoláva vznik kožných infekcií alebo reakcií na cudzie telá;

- zmeny pigmentácie kože v mieste vpichu;

- zápalové ochorenia kože v ošetrovaných oblastiach znemožňujú injektovateľnú biorevitalizáciu - následky môžu byť veľmi negatívne a môžu spôsobiť šírenie zápalového procesu;

- prítomnosť niekoľkých sprievodných chorôb;

- neprijateľná je aj biorevitalizácia injekcie počas tehotenstva a dojčenia;

- komplikácie po biorevitalizácii po injekcii sú nevyhnutné, ak existuje alergia na zložky lieku alebo autoimunitné ochorenia;

- užívanie antikoagulancií (riedidiel krvi, napríklad kyseliny acetylsalicylovej v aspiríne) môže tiež spôsobiť negatívne následky biorevitalizácie injekcií;

- so zvýšenou tendenciou vytvárať keloidné jazvy sa biorevitalizácia injekcie neodporúča, pretože následky môžu byť nepredvídateľné;

- pri manipulácii s ihlou kozmetička nie je schopná úplne kontrolovať subkutánnu oblasť lieku a vyhnúť sa zavedeniu lieku do krvných ciev, najmä do oblasti očí. Na druhej strane príliš povrchné podávanie liečiva môže spôsobiť objavenie sa nepravidelností na povrchu kože, zatiaľ čo príliš hlboké môže byť neúčinné;

- bolestivosť postupu;

- Ekonomický faktor a relatívne vysoké náklady na postup.

Všetkým týmto negatívnym prejavom injekčnej techniky kyseliny hyalurónovej sa dá vyhnúť použitím alternatívnej technológie laserovejforézy (quantoforézy) QUANTOL.

Táto metodika v rámci svojej kozmetickej účinnosti nie je nižšia alebo dokonca lepšia ako v súčasnosti prevládajúca a najbežnejšia metóda vstrekovania kyseliny hyalurónovej do pokožky, ktorá má množstvo nevýhod a komplikácií v závislosti od mnohých faktorov vrátane tých, ktoré sú spojené s personálnymi chybami, miestnymi kožnými faktormi, precitlivenosť kože, prítomnosť chronických chorôb.

Týmto spôsobom biorevitalizácie sa dosiahne oveľa objemnejšia a rovnomernejšia distribúcia kyseliny hyalurónovej v koži v porovnaní s injekčnými metódami.

Technológia QUANTOL je v skutočnosti kombinovanou technikou fotodynamického omladzovania (biorevitalizácie) pokožky a priťahuje pozornosť odborníkov z dôvodu bezpečnosti, účinnosti, bezbolestnosti, neprítomnosti nežiaducich vedľajších účinkov a dostupnosti pre široké použitie.

V širšom aspekte, okrem cieľov omladenia pleti, je možné túto metódu úspešne použiť na liečenie mnohých kožných ochorení, napríklad fotodamáže pokožky, hyperpláziu mazových žliaz, akné a mnoho ďalších stavov, s ktorými sa dermatológovia a kozmetológovia stretávajú atď. (Viac informácií ...)

V tomto historickom prehľade kyselina hyalurónová, pokúsili sme sa upútať pozornosť návštevníkov webových stránok na najdôležitejšie objavy a štúdie, na ktorých boli založené všetky následné práce v oblasti štúdia tohto jedinečného polysacharidu. Výber údajov a zdrojov na preskúmanie je úplne subjektívny.

ÚVOD

Momentálne nie sú k dispozícii žiadne zásadne nové údaje o kyseline hyalurónovej, a preto sme sa rozhodli vytvoriť tému tohto malého článku „Kyselina hyalurónová - história“. Vzhľadom na súčasné tempo vedeckého myslenia nemá každý dostatok času sa obzrieť a pozrieť sa na literatúru, ktorá popisuje kľúčové objavy v oblasti kyselina hyalurónováPreto sme sa pokúsili zhrnúť existujúce výsledky. Výber zdrojov a údajov vychádza iba z našich vedomostí a názorov, a preto sa môže líšiť od názorov ostatných ľudí.

AKO JE VŠETKY BEGAN

Maďarský vedec Bandi Balazs emigroval z Maďarska v roku 1947. Po príchode do Švédska začal pracovať v Štokholme na biologickej úlohe extracelulárnych polysacharidov a venoval osobitnú pozornosť hyaluronát.

V tých rokoch vyzerala kultúrna práca s bunkami veľmi odlišne. Predtým, ako sa objavili antibiotiká, boli všetky manipulácie uskutočňované za prísne sterilných podmienok blízkych podmienkam na operačnej sále. Bunky boli pestované na suspendovaných fibrínových zrazeninách. Fibroblasty sa izolovali z drvených kuracích sŕdc, z ktorých sa kúsky položili na fibrínové zrazeniny, a rýchlosť rastu kultúry sa určila zmenou v oblasti kolónií, ktorá indikovala rýchlosť a vzdialenosť bunkovej migrácie.

Jedným z prvých objavov bola izolácia tkaniva pupočníka hyaluronát aby sa potom zaviedla do fibroblastovej kultúry.

hyaluronát vylučovaný z pupočníkovej krvi a vyzrážaný na alkohol. Potom bol purifikovaný z proteínov trepaním extraktu v zmesi chloroformu a izoamylalkoholu (podľa Sewagovej metódy). Uskutočnil sa pokus o sterilizáciu viskózneho roztoku hyaluronátu. Nedalo sa to filtrovať, takže vedci nakoniec použili autoklávovanie.

Na začiatku práce boli urobené tri veľmi dôležité postrehy, ktoré položili základ pre ďalší výskum.

Po prvé, bolo možné izolovať hyaluronát z tkaniva pupočníka a za rôznych iónových podmienok sa získal materiál s rôznym stupňom viskozity. Najvyššia viskozita bola v roztoku pripravenom v destilovanej vode. Vedci navrhli, že viskozita roztoku hyaluronátu môže kolísať v závislosti od pH a iónovej sily rozpúšťadla. Teraz to už všetci vedia, ale v tom čase Raymond Fuoss opísal tento jav iba pre riešenia syntetických polyelektrolytov. Časopis „Viskozitná funkcia kyseliny hyalurónovej ako polyelektrolytu“ bol publikovaný v časopise Journal of Polymer Chemistry. Od tejto chvíle sa vedci intenzívne zaoberajú štúdiom fyzikálnych a chemických vlastností hyaluronátu.

Po druhé, keď sa snažil sterilizovať hyaluronát pomocou UV žiarenia, úplne stratil svoju viskozitu v roztoku. Ďalej sa ukázalo, že hyaluronát, ktorý je vystavený pôsobeniu elektrónového toku, tiež podlieha úplnej degradácii. Teraz už môžeme povedať, že toto pozorovanie bolo jedným z prvých opisov štiepenia hyaluronátu voľných radikálov.

Po tretie, skúmali sa aj biologické účinky. hyaluronáta niekoľko sulfátovaných polysacharidov - heparín, heparan sulfát (ktorý sa v týchto rokoch nazýval „kyselina heparín monosulfurová“) a synteticky sulfátovaný hyaluronát. Vedci porovnali svoj účinok na rast bunkových kultúr, antikoagulačnú aktivitu a antihyaluronidázovú aktivitu. Hlavnou úlohou bolo zistiť, či je heparín skutočne sulfátovaný hyaluronát, ako tvrdí Asboe-Hansen, ale dospelo sa k záveru, že toto tvrdenie je nesprávne.

Hyaluronát, na rozdiel od sulfátovaných polysacharidov, urýchľoval rast buniek, a toto bol možno jeden z prvých opisov interakcie hyaluronátu so živými bunkami - dnes vieme, že táto interakcia je sprostredkovaná bunkovým receptorom. Je zaujímavé, že išlo o jednu z prvých štúdií na štúdium biologickej aktivity heparan sulfátu.

Všetky vyššie uvedené štúdie sa uskutočňovali v krátkom časovom období, od septembra 1949 do decembra 1950, to znamená, že trvalo iba o niečo viac ako 1 rok.

ZVEREJNENIE HYALURONÁTU A HYALURONIDázy

Karl Meyer objavil hyaluronátv roku 1934 pri práci na očnej klinike na Columbia State University. Izoloval túto zlúčeninu zo sklovca oka kravy za kyslých podmienok a nazval ju kyselinou hyalurónovou z gréckych hyalos - sklovca a kyseliny urónovej, ktorá bola súčasťou tohto polyméru. Okamžite by sa malo povedať, že predtým boli izolované ďalšie polysacharidy (chondroitín sulfát a heparín). Už v roku 1918 Levene a Lopez-Suarez izolovali polysacharid pozostávajúci z glukozamínu, kyseliny glukurónovej a malého množstva síranových iónov zo sklovca a pupočníkovej krvi. Potom sa to nazývalo mukoitín-kyselina sírová, ale v súčasnosti sa bežne nazýva hyauluronát, ktorý sa vo svojej práci izoloval s malou prímesou síranu.

V nasledujúcich desiatich rokoch Karl Meyer a niekoľko ďalších autorov izolovali hyaluronát z rôznych tkanív. Napríklad sa zistilo v kĺbovej tekutine, pupočnej šnúre a tkanive kohútika. Najzaujímavejšie bolo, že v roku 1937 sa Kendallovi podarilo izolovať hyaluronát zo streptokokových kapsúl. Následne bol hyaluronát izolovaný z takmer všetkých tkanív tela stavovcov.

Ešte pred objavením hyaluronátu objavil Duran-Reynals v semenníkoch biologicky aktívny faktor. Neskôr sa stal známym ako „všadeprítomný faktor“. Jed včiel a lekárskych pijavíc mal podobný účinok. Pri subkutánnom podaní v zmesi s maskarou sa zaznamenalo veľmi rýchle rozšírenie čierneho zafarbenia. Tento faktor bol enzým, ktorý ničí hyaluronktorý sa neskôr nazýval hyaluronidáza, Aj v krvi cicavcov je prítomné určité množstvo hyaluronidáz, ale k ich aktivácii dochádza iba pri kyslých hodnotách pH.

PRIDELENIE HYALURONÁTU

Úplne prvá metóda izolácie hyaluronátu bola štandardným protokolom na izoláciu polysacharidov, to znamená, že všetok proteín bol odstránený z extraktu pomocou Sewagovej metódy alebo pomocou proteáz. Potom sa polymér vyzrážal na frakcie pridaním etylalkoholu.

Veľkým krokom vpred bolo oddelenie nenabitých polysacharidov, ktoré vyvinul John Scott pri štúdiu metód zrážania katiónovým detergentom (CPC, cetylpyridíniumchlorid), pri ktorom sa zmenila koncentrácia solí. hyaluronáts vysokou účinnosťou sa oddelil od sulfátovaných polysacharidov. Tento spôsob sa môže tiež použiť na frakcionáciu podľa molekulovej hmotnosti. V podstate sa podobné výsledky dajú získať pomocou iónomeničovej chromatografie.

ŠTRUKTÚRA A ZHODA HYALURONÁTU

Chemickú štruktúru polysacharidovej molekuly dešifroval Karl Meyer a jej kolegovia v 50. rokoch 20. storočia. Teraz každý vie, že hyaluronát je dlhá molekula polyméru pozostávajúca z disacharidových jednotiek, ktorých zložkami sú N-acetyl-D-glukozamín a kyselina D-glukurónová, ktoré sú spojené väzbami B1-4 a B1-3. Karl Meyer nepoužil štandardný spôsob na štúdium štruktúry neporušeného polysacharidu. Namiesto toho strávil hyaluronidázaštiepenie polysacharidu, získanie zmesi disacharidov a oligosacharidov, ktoré bol schopný úplne charakterizovať. Na základe získaných výsledkov dospel k záveru o možnej štruktúre pôvodnej molekuly polyméru.

Konformačná analýza „vlákien“ pozostávajúcich z hyaluronátu sa najprv uskutočnila pomocou röntgenovej kirstallografickej metódy. Na konferencii v Turku v roku 1972 sa medzi skupinami odborníkov diskutovalo o tom, či hyaluronát má špirálovú štruktúru alebo nie. Hyaluronát samozrejme môže tvoriť špirály rôznych štruktúr v závislosti od iónového zloženia rozpúšťadla a podielu vody v ňom. V 70. a 80. rokoch sa v literatúre objavili rôzne verzie štruktúry hyaluronátu.

Prielom v tejto oblasti bol dielom Johna Scotta. S prihliadnutím na skutočnosť, že hyaluronát má nízku reaktivitu počas oxidácie peroxidázou vo vodnom roztoku, dospel k záveru, že vo vode akceptuje konformáciu s vodíkovými väzbami vnútri reťazca. Následne bola jeho hypotéza potvrdená pomocou NMR analýzy av roku 1927 Atkins a kol. Opísali konformáciu ako dvojitú špirálovitú.

FYZIKÁLNE A CHEMICKÉ VLASTNOSTI

Pred päťdesiatimi rokmi nebola známa chemická štruktúra hyaluronátu a jeho makromolekulové vlastnosti - hmotnosť, homogenita, tvar molekuly, stupeň hydratácie a interakcia s inými molekulami. Za posledných 20 rokov to bolo stredobodom pozornosti A. G. Ogstona a jeho spolupracovníkov v Oxforde, Dr. Balazsa a jeho kolegov v Bostone, Torvarda C Laurenta, pracujúcich v Štokholme a niekoľkých ďalších laboratórií.

Hlavným problémom bola izolácia hyaluronátu očisteného od bielkovín a ďalších zložiek, ktorá sa musí vykonať pred akýmikoľvek metódami fyzikálneho výskumu. Počas čistiaceho procesu vždy existuje riziko degradácie polymérnej štruktúry. Ogston použil ultrafiltračnú techniku, čo naznačuje, že voľné proteíny by prekonali filter a proteíny spojené s hyaluronátbude filtrom oneskorená. Predmetom štúdie bol komplex s obsahom bielkovín 30%. Iní autori sa pokúsili použiť rôzne metódy fyzikálnej, chemickej a enzymatickej purifikácie, ktoré umožnili znížiť obsah proteínov na niekoľko percent. Výsledky fyzikálno-chemickej analýzy zároveň poskytli úplnejší opis molekuly hyaluronát, Jeho molekulová hmotnosť je blízka niekoľkým miliónom, hoci rozptyl medzi vzorkami bol pomerne vysoký. Rozptyl svetla ukázal, že sa molekula správa ako náhodne skrútená, pomerne tesne zbalená reťaz s polomerom ohybu asi 200 nm. Balenie a neaktívna mobilita reťazca je spojená s prítomnosťou vnútroreťazcových vodíkových väzieb, ktoré boli uvedené vyššie. Náhodne skrútená štruktúra úplne zodpovedá získanému pomeru viskozity a molekulovej hmotnosti látky. Ogston a Stanier použili metódy sedimentácie, difúzie, separácie v závislosti od gradientu strihu a viskozity, ako aj metódu dvojitého lomu, ktorá ukázala, že molekula hyaluronátu má formu vysoko hydratovanej gule, ktorá úplne zodpovedá známym vlastnostiam molekúl s náplňou vo forme náhodne stočenej špirály.

ANALYTICKÉ METÓDY

Jediným možným spôsobom kvantifikácie kyseliny hyalurónovej bolo izolovať polysacharid v jeho čistej forme a zmerať jeho obsah kyseliny urónovej a / alebo N-acetylglukozamínu. Metódy voľby v tomto prípade boli Discheho karbazolové metódy na odhadovanie obsahu kyseliny urónovej a Elson-Morganova reakcia na hladine hexozamínu.

V tomto prípade je ťažké preceňovať dôležitosť použitia karbazolovej metódy. Pri analýze hyaluronátu bolo niekedy potrebné použiť miligramy látky.

Ďalším krokom bol objav špecifických enzýmov. Hyaluronidáza z húb Streptomyceskonal iba ďalej hyaluronátzatiaľ čo sa tvoria nenasýtené hexa- a tetrasacharidy. Pri analýze obsahu hyaluronáttáto vlastnosť húb by sa mohla použiť, najmä ak boli v médiu prítomné ďalšie polysacharidy a nečistoty a nenasýtená forma kyseliny hyalurónovej sa môže použiť na zníženie detekčného limitu produktu. Enzymatická metóda významne zvýšila detekčnú citlivosť hyaluronátu, čím sa zvýšila na úroveň mikrogramov.

Posledným krokom bolo použitie afinitných proteínov, ktoré sa špecificky viažu na hyaluronát. Tengblad použil proteíny viažuce hyaluronát z chrupavky a Delpech následne použil hyaluronektín izolovaný z mozgu. Tieto proteíny môžu byť použité v analýze analogicky s imunologickými metódami a po vývoji tejto metódy je presnosť kvantifikácie hyaluronátsa zvýšila na úroveň nanogramov, čo umožnilo určiť obsah hyaluronátvo vzorkách tkanív a fyziologických tekutinách. Metóda Tengblad sa stala základom pre väčšinu neskorších prác Uppsaly.

VIZUALIZÁCIA HYALURONÁTU

Detekcia hyaluronátu v tkanivových rezoch úzko súvisí s analýzou polymérov v tkanivovej tekutine. Od samého začiatku sa používali nešpecifické spôsoby farbenia štandardnými farbivami. John Scott bol schopný zvýšiť špecifickosť tým istým princípom, aký použil pri vývoji spôsobu frakcionácie aniónových polysacharidov v detergentoch. Farbil ich farbivom Alcian blue v rôznych iónových koncentráciách, zatiaľ čo sa mu podarilo dosiahnuť zreteľné zafarbenie rôznych polysacharidov. Neskôr prešiel na použitie kupromerónovej modrej.

Súčasne môže byť hyaluronát dobre detekovaný na rezoch tkaniva pomocou špecifických proteínov, ktoré sa naň viažu. Prvé správy o tejto metóde boli uverejnené v roku 1985. Táto metóda bola použitá s veľkým úspechom a vďaka nej boli získané cenné údaje o distribúcii obsahu hyaluronátu v rôznych orgánoch a tkanivách.

hyaluronátmôže byť tiež detekovaná elektrónovou mikroskopiou. Bohužiaľ, prvé obrázky, ktoré zverejnil Jerome Gross, nevideli žiadne jemné detaily štruktúry. Prvú prácu, ktorá dobre vysvetľuje výsledky, možno považovať za článok od Fesslera a Fesslera. Bolo naznačené, že hyaluronát má predĺženú jednoreťazcovú štruktúru.

Potom Robert Fraser opísal ďalšiu elegantnú metódu vizualizácie umiestneného pericelulárneho telesa hyaluronát, K fibroblastovej kultúre pridal suspenziu hyaluronátových častíc. V hrubej vrstve obklopujúcej fibroblastovú kultúru sa nenašli žiadne častice. Ukázalo sa teda, že v pericelulárnom priestore je hyaluronát, ktorý sa rozpadá pôsobením hyaluronidázy.

Elasticita a reológia

Na základe veľkosti jednej z najväčších molekúl hyaluronát, je ľahké predpokladať, že pri koncentrácii rádovo 1 g / l takmer úplne nasýtili roztok. Pri vysokých koncentráciách sa molekuly zmiešajú a roztok je druh siete hyaluronátových reťazcov. Polymerizačný bod sa určuje pomerne ľahko - to je okamih nasýtenia roztoku, po ktorom jeho viskozita so zvyšujúcou sa koncentráciou prudko stúpa. Ďalšou vlastnosťou roztoku, ktorá závisí od jeho koncentrácie, je šmyková rýchlosť viskozity. Tento jav opísali Ogston a Stanier. Elastické vlastnosti roztoku sa menia so zvyšujúcou sa koncentráciou a molekulovou hmotnosťou polymérov. Fluidná čistota hyaluronátbol prvýkrát identifikovaný Jensenom a Koefoedom a podrobnejšia analýza viskozity a elasticity roztoku bola vykonaná Gibbsom a kol.

Je toto zaujímavé správanie roztoku výsledkom čisto mechanického prepletenia polymérnych reťazcov alebo súvisí tiež s ich chemickou interakciou? V predchádzajúcich prácach Ogstona sa diskutovalo o možných interakciách sprostredkovaných proteínom. Welsh et al dostali náznaky reťazových interakcií medzi sebou. To sa dosiahlo pridaním krátkych reťazcov hyaluronátu (60 disacharidov) do roztoku, čo spôsobilo zníženie jeho elasticity a viskozity. Je zrejmé, že v tomto prípade došlo ku konkurenčnej interakcii krátkych a dlhých reťazcov. V neskorších prácach Johna Scotta sa ukázalo, že konformácia hyaluronátu s prítomnosťou hydrofóbnych väzieb medzi reťazcami dobre korešponduje s tendenciou hyaluronátu vytvárať helixy so susednými molekulami, ktoré boli stabilizované hydrofóbnymi väzbami. Preto je najpravdepodobnejšia interchainová interakcia, ktorá do značnej miery určuje reologické vlastnosti hyaluronát.

FYZIOLOGICKÁ ÚLOHA HYALURONICKÝCH POLYMÉROV

Otváranie väzobných reťazí hyaluronátso zvýšením koncentrácie, ktorá sa môže vyskytovať v tkanivách, sa stal základom predpokladu, že hyaluronát sa môže podieľať na mnohých fyziologických procesoch vytvorením veľkej trojrozmernej siete reťazcov. Diskutovalo sa o najrozmanitejších vlastnostiach takýchto sietí.

Viskozita. Na mazanie kĺbov sa môže použiť veľmi vysoká viskozita koncentrovaných roztokov hyaluronátu, ako aj závislosť šmyku od viskozity. Hyaluronát je vždy prítomný vo všetkých priestoroch zdieľajúcich pohyblivé prvky tela - v kĺboch \u200b\u200ba medzi svalmi.

Osmotický tlak.Osmotický tlak roztokov hyaluronátvo veľkej miere závisí od ich koncentrácie. Pri vysokých koncentráciách je koloidný osmotický tlak takého roztoku vyšší ako pri roztokoch albumínu. Táto vlastnosť sa môže použiť v tkanivách na udržanie homeostázy.

Odpor prietoku, Hustá sieť reťazí je pomerne dobrou prekážkou toku tekutiny. hyaluronátskutočne môže tvoriť prekážku toku tekutín v tkanivách, čo sa prvýkrát ukázalo v deň.

Vylúčený objem. Trojrozmerná sieť reťazcov vytlačí všetky ostatné makromolekuly z roztoku. Dostupný objem sa môže zmerať v dialyzačnom vyrovnávacom teste roztoku hyaluronátu a tlmivého roztoku a ukázalo sa, že získaný účinok sa zhodoval s vypočítaným účinkom podľa teoretických štúdií Ogstona. O vylučovacom účinku sa diskutovalo v súvislosti so separáciou proteínu obsiahnutého vo vaskulárnom lôžku a v extracelulárnom priestore, považoval sa však za mechanizmus akumulácie fyziologických a patologických molekúl v spojivovom tkanive. Vylúčenie polymérov znižuje rozpustnosť mnohých proteínov.

Difúzna bariéra. Pohyb makromolekúl cez roztok hyaluronátmôže byť meraná sedimentačnou a difúznou analýzou. Čím väčšia je molekula, tým nižšia bude jej rýchlosť. Tento účinok je spojený s tvorbou difúznych bariér v tkanivách. Napríklad pericelulárna vrstva hyaluronátu môže chrániť bunky pred účinkami makromolekúl vylučovaných inými bunkami.

Proteíny viazané na HYALURON (HYALADERINY)

Proteoglykánmi.Až do roku 1972 sa verilo, že hyaluronát je inertná zlúčenina a neinteraguje s inými makromolekulami. V roku 1972 to odhalili Hardingham a Muir hyaluronátsa môžu viazať na proteoglykány chrupavky. Hascall a Heinegardove štúdie ukázali, že hyaluronát sa môže špecificky viazať na N-terminálnu doménu globulárnej časti proteoglykánov a spojovacích proteínov. Táto väzba je dostatočne silná a niekoľko proteoglykánov môže sedieť na jednom reťazci hyaluronátu, v dôsledku čoho sa v chrupavkách a iných tkanivách tvoria veľké zhluky molekúl.

Hyaluronátové receptory. V roku 1972, Pessac a Defendi a Wasteson a kol., Ukázali, že suspenzie niektorých buniek sa začínajú agregovať, keď sa pridá hyaluronát. Toto bola prvá správa naznačujúca špecifickú väzbu. hyaluronáts povrchom buniek. V roku 1979 to Underhill a Toole odhalili hyaluronátsa skutočne viaže na bunky a v roku 1985 bol izolovaný receptor zodpovedný za túto interakciu. V roku 1989 hneď dve skupiny autorov publikovali práce, v ktorých sa preukázalo, že receptor navádzajúci lymfocyty CD44 má schopnosť viazať sa na hyaluronát v chrupavke. Čoskoro sa ukázalo, že receptor izolovaný Underhill a Toole bol úplne identický s CD44. Ešte jeden hyaluronátVäzbový proteín, ktorý bol neskôr izolovaný zo supernatantu bunkovej kultúry 3T3 v roku 1982 Turleyom a kol., sa ukázal ako RGH (hyaluronátový receptor sprostredkujúci mobilitu). Po týchto prácach bola objavená celá séria hyaladherínov.

ÚLOHA HYALURONÁTU V CELKE

Až do objavenia hyaladherínov sa verilo, že hyaluronát ovplyvňuje bunky iba fyzikálnymi interakciami. Dôkazy o tom, že hyaluronát môže hrať úlohu v biologických procesoch, boli sporadické a zväčša sa zakladali na neprítomnosti alebo prítomnosti hyaluronátu v rôznych biologických procesoch. Mnoho špekulácií času bolo postavených na metódach nešpecifického histologického farbenia.

Začiatkom 70. rokov sa v Bostone uskutočnila veľmi zaujímavá štúdia. Bryan Toole a Jerome Gross ukazujú, že počas regenerácie končatiny končatiny hyaluronátje syntetizovaný hneď na začiatku a potom jeho množstvo klesá pôsobením hyaluronidázy, zatiaľ čo hyaluronát je nahradený chondroitín sulfátom. Rovnakým spôsobom sa udalosti vyvíjajú počas tvorby rohovky u kurčaťa. Toole indikoval, že akumulácia hyaluronátu sa zhoduje s obdobiami migrácie buniek do tkaniva. Ako bolo uvedené vyššie, Toole tiež vykonal prvé štúdie membránovo viazaných hyaladherínov a so objavom hyaluronátových receptorov máme stále viac dôvodov domnievať sa, že hyaluronáthrá úlohu pri regulácii bunkovej aktivity, napríklad počas pohybu buniek. Za posledných 10 rokov došlo k nárastu počtu publikácií venovaných úlohe hyaluronátu v bunkovej migrácii, mitóze, zápale, raste tumoru, angiogenéze, oplodnení atď.

HYALURONÁTOVÁ BIOSYNTÉZA

Štúdie biosyntézy hyaluronátu možno rozdeliť do 3 fáz. Prvým autorom a najvýznamnejším vedcom v prvej fáze bol Albert Dorfman. On a jeho kolegovia začiatkom 50. rokov popísali zdroj monosacharidov, ktoré boli zabudované do hyaluronických reťazcov streptokokov. V roku 1955 Glaser a Brown prvýkrát ukázali možnosť syntézy hyaluronátu ako samostatného syntetického systému mimo bunky. Použili enzým izolovaný z kuracích sarkómových buniek Rous a zaviedli 14C UTP-glukurónovú kyselinu značenú izotopom 14C do kompozície hyaluronových oligosacharidov. Skupina Dorfman tiež izolovala prekurzorové molekuly kyseliny UTP-glukurónovej a UTP-N-acetylglukozamínu z extraktu streptokokov a tiež syntetizovala hyaluronátza použitia enzýmovej frakcie izolovanej zo streptokokov.

V druhej fáze sa ukázalo, že hyaluronát by sa mal syntetizovať cestou odlišnou od glykozaminoglykánov. Syntéza hyaluronátu na rozdiel od sulfátovaných polysacharidov nevyžaduje aktívnu syntézu proteínov. Syntéza zodpovedná za to sa nachádza v bakteriálnej protoplastovej membráne a plazmatickej membráne eukaryotických buniek, ale nie v Golgiho aparáte. Syntetické zariadenie sa považuje za umiestnené na vnútornej strane membrány, pretože sa ukázalo byť necitlivé na účinky extracelulárnych proteáz. Hyaluronický reťazec ďalej preniká do membrány, pretože expozícia bunkám hyaluronidázy zvyšuje produkciu hyaluronát, V 80. rokoch sa uskutočnilo niekoľko neúspešných pokusov o izoláciu syntázy z eukaryotických buniek.

Začiatkom 90. rokov sa ukázalo, že hyaluronát-syntáza je faktorom virulencie streptokokov skupiny A. Na základe týchto údajov boli dve skupiny autorov schopné určiť gén a lokus zodpovedný za syntézu hyaluronických kapsúl. Čoskoro bolo možné klonovať gén pre túto syntázu a úplne ju sekvenovať. Homologické bielkoviny izolované v posledných rokoch zo všetkých stavovcov poskytli cenné informácie o svojej štruktúre. Dôležitou oblasťou výskumu môže byť štúdium mechanizmov regulácie aktivity tejto syntázy.

METABOLIZMUS A HYALURONÁTOVÁ DEGRADÁCIA

Detekcia hyaluronátu v krvi, ako aj jeho prenos z tkanív cez lymfatický systém, sa stal základom spoločnej štúdie, ktorú vykonal Dr. Robert Fraser v Melbourne a laboratórium v \u200b\u200bUppsale. Stopy polysacharidu značeného tríciom v acetylovej skupine sa našli v krvi po podaní králikom a ľuďom a označenie zlúčeniny zmizlo s polčasom rozpadu niekoľko minút. Čoskoro bolo zrejmé, že väčšina žiarenia sa akumulovala v pečeni, kde sa polymér rýchlo štiepil. Po 20 minútach sa v krvi detegovala voda označená tríciom. Autorádiogramy ukázali, že k akumulácii žiarenia došlo aj v slezine, lymfatických uzlinách a kostnej dreni. Bunkovou frakcionáciou sa tiež ukázalo, že k akumulácii v pečeni došlo hlavne v endoteli dutín, čo sa neskôr potvrdilo v štúdii in vitro a rádiografii in situ. Tieto bunky majú receptor pre endocytózu hyaluronátu, ktorý sa zásadne líši od iných proteínov viažucich hyaluronát. Ďalej sa polysacharid štiepi v lyzozómoch. Hyaluronát sa skúmal aj v iných tkanivách a teraz existuje úplný obraz o metabolizme tohto polysacharidu.

V poslednej dobe je ďalším aspektom katabolizmu hyaluronátstal sa predmetom veľkého počtu štúdií. Z diel Guntera Kreila (Rakúsko) a Roberta Sterna a jeho kolegov (San Francisco) sa stali známe štruktúry a vlastnosti rôznych hyaluronidáz. Tieto údaje sa stali základom štúdií, ktoré objasnili biologickú úlohu týchto enzýmov.

HYALURONÁT PRE RÔZNE CHOROBY

Od samého začiatku sa vedci zaujímali o vlastnosti hyaluronátu obsiahnutého v kĺbovej tekutine, najmä o zmenu úrovne chorôb kĺbov. Ukázalo sa tiež, že hyperprodukcia hyaluronátu je pozorovaná pri mnohých chorobách, napríklad pri malígnych nádoroch - mezoteliómoch, ale v tom čase ešte nebolo dosť presných a citlivých metód na detekciu hyaluronátu. Táto situácia nastala až do 80. rokov, keď boli vyvinuté nové analytické metódy, ktoré opäť priťahovali záujem vedcov o kolísanie obsahu. hyaluronáts rôznymi chorobami. Obsah hyaluronátu v krvi bol stanovený v normálnych a patologických podmienkach, najmä pri cirhóze. Pri reumatoidnej artritíde sa obsah hyaluronátu v krvi počas fyzickej námahy zvýšil, najmä ráno, čo poskytlo vysvetlenie príznaku „rannej stuhnutosti“ v kĺboch. Pri rôznych zápalových ochoreniach sa hladina hyaluronátu v krvi zvýšila lokálne aj systémovo. Poruchy orgánov sa dajú vysvetliť aj akumuláciou hyaluronátu, ktorý spôsobil opuch intersticiálneho tkaniva.

KLINICKÉ POUŽITIE

Hlavným prielomom v lekárskom použití hyaluronátu je výlučne zásluha Dr. Balazsa. Vyvinul základné princípy a nápady, prvý, ktorý syntetizoval formu hyaluronátu, ktorú pacienti dobre tolerovali, propagoval myšlienku priemyselnej výroby hyaluronátu a popularizoval myšlienku použitia polysacharidov ako liekov.

V 50-tych rokoch 20. storočia sa Balazs sústredil na štúdium zloženia sklovca a začal experimenty s náhradami možných protetík pri liečbe odlúčenia sietnice. Jednou z najzávažnejších prekážok pri použití hyaluronových protéz bola vysoká obtiažnosť izolovania čistého hyaluronátu bez akýchkoľvek nečistôt, ktoré spôsobujú zápalovú reakciu.

Balazs vyriešil tento problém a výsledné liečivo sa nazýva NVF-NaHU (nezápalová frakcia) hyaluronátsodný). V roku 1970 bol hyaluronát prvýkrát zavedený do kĺbov jazdiacich koní trpiacich artritídou a klinicky výrazná odpoveď sa získala na liečbu so znížením príznakov choroby. O dva roky neskôr bol Balazs schopný presvedčiť vedenie spoločnosti Pharmacia AB v Uppsale, aby zahájilo výrobu hyaluronátu na použitie v klinickej a veterinárnej praxi. Miller a Stegman, na základe rady Dr. Balazsa, začali používať hyaluronát ako súčasť implantovateľných vnútroočných šošoviek a hyaluronát sa rýchlo stal jednou z najbežnejšie používaných zložiek v chirurgickej oftalmológii známej ako Healon®. Odvtedy bolo navrhnutých a testovaných mnoho ďalších použití hyaluronátu. Jeho deriváty (napr. Priečne štruktúrované) hyaluron) boli tiež testované na použitie na klinike. Osobitne by som chcel poznamenať, že už v roku 1951 Balazs informoval o biologickej aktivite prvých získaných hyaluronátových derivátov.

ZÁVER

V tejto správe sme dokázali pokryť iba hlavné a najvýznamnejšie udalosti v histórii hyaluronátového výskumu a na našej webovej stránke sa bude diskutovať o mnohých ďalších zaujímavých faktoch a údajoch. Z predložených článkov bude zrejmé, že výskum hyaluronátu je čoraz dôležitejší a nevyhnutnejší. Dnes sa vo vedeckej literatúre každoročne vydáva 300 až 400 článkov venovaných vedeckej literatúre. hyaluronát.

Prvá medzinárodná konferencia venovaná výlučne hyaluronátu sa konala v Saint-Tropez v roku 1985, po ktorej sa konali kongresy v Londýne (1988), Štokholme (1996) a Padove (1999).

Rastúci záujem je v mnohých ohľadoch spojený s úspešnou prácou Endre Balazsa, ktorý urobil veľa v oblasti výskumu vlastností hyaluronátu, získal prvé údaje o ňom, naznačil možnosť klinického použitia hyaluronáta je inšpiráciou, ktorá vedie vedeckú obec k novému výskumu.